NSUN2介导的m5C甲基化损害子宫内膜容受性

子宫内膜蜕膜化受损是复发性种植失败（RIF）的主要原因。RNA甲基化修饰，尤其是NSUN家族介导的m5C，对多种生理事件至关重要，如母源-合子转变、配子发生、胚胎发育、生物体寿命和细胞周期。然而，NSUN家族介导的m5C修饰与RIF之间的调控机制仍未知。我们从生殖细胞图谱中获取了15个人类子宫内膜样本在增殖期和分泌期的NSUN2表达数据。通过m5C-BS-seq阐明了m5C位点和基因的整体模式，而通过dot blot实验揭示了不同组中整体m5C水平。BrdU和western blotting实验用于评估NSUN2在增殖和自噬中的作用。通过体外模型（Ishikawa细胞单层与BeWo球体共培养）评估NSUN2介导的m5C修饰对胚胎附着的影响，并通过实时逆转录PCR和western blotting在Ishikawa细胞中评估其下游靶标。通过Cut&Tag和coimmunoprecipitation实验确定了NSUN2调控其下游靶标表达的分子机制。通过先前的单细胞RNA测序数据，NSUN2在增殖期的SOX9+细胞中增加，并在上皮细胞类型中广泛分布。Ishikawa细胞系中NSUN2过表达（NSUN2OE）升高了m5C水平并促进了细胞增殖和自噬。NSUN2OE降低了BeWo细胞球的附着效率。过表达的NSUN2通过诱导外显子跳跃增加了STAT1和MMP14 mRNA的表达。NSUN2通过m5C修饰与CLDN4相互作用，NSUN2OE或NSUN2敲低导致CLDN4相似的表达变化趋势。NSUN2的过表达通过下调SIRT4蛋白水平增加了CLDN4的H3K9ac修饰，导致CLDN4 mRNA表达上调。我们的结果揭示了NSUN2介导的m5C与RIF之间新的复杂调控机制，并为RIF提出了潜在的新治疗策略。