TRIM28作为SUMO连接酶使TRAF6SUMO化并调节HBV复制细胞中NF-κB的激活

背景：乙型肝炎病毒（HBV）是一种对人类健康构成严重威胁的病原体。近年来，HBV与宿主之间的相互作用取得了很大进展。SUMO化参与病毒相关的癌症进展，但关于SUMO化对HBV复制和抗病毒防御的机制研究较少。肿瘤坏死因子受体相关因子6（TRAF6）是NF-κB通路的关键衔接蛋白。本文聚焦于TRIM28在HBV复制细胞中调节TRAF6SUMO化的作用。方法：通过抗SUMO1抗体免疫沉淀从总细胞蛋白中富集SUMO1修饰的TRAF6蛋白，然后用抗TRAF6抗体通过western blot检测SUMO化的TRAF6。通过免疫沉淀和LC–MS/MS鉴定TRAF6与TRIM28之间的相互作用。通过氨基酸位点突变鉴定TRAF6SUMO化的修饰位点。通过免疫组织化学和免疫荧光评估TRAF6和TRIM28的表达和定位。使用流体动力学注射HBV小鼠模型确定TRIM28介导的TRAF6SUMO化在体内的功能。结果：结果表明，在HBV复制细胞中，SUMO1修饰的TRAF6水平升高。Lys453是TRAF6的主要SUMO1修饰位点。TRAF6蛋白的SUMO化和泛素化之间存在拮抗作用。SUMO连接酶TRIM28负责催化TRAF6SUMO化。与野生型TRAF6相比，其SUMO位点突变体TRAF6K453R促进NF-κB激活。此外，TRIM28过表达减弱TRAF6介导的NF-κB激活，从而抑制体内HBV复制。结论：我们的发现表明，SUMO连接酶TRIM28影响TRAF6对NF-κB激活、核质穿梭和HBV复制相关指标的能力。我们的数据揭示，TRIM28介导的TRAF6SUMO化是调节炎症反应的一种新机制，可能为控制抗HBV的新策略铺平道路。