CD47阻断驱动的坏死性凋亡与BCL-2抑制驱动的凋亡在淋巴恶性肿瘤中的互补作用

免疫检查点阻断CD47在淋巴恶性肿瘤中显示出有前景的结果，其效应归因于促进肿瘤细胞吞噬。然而，已报道了其他细胞毒性细胞死亡机制，可能有助于整体抗肿瘤活性。尽管先前研究强调了caspase非依赖性细胞死亡机制，但该机制尚未被充分表征，因此需要进一步研究以全面理解CD47阻断的抗肿瘤机制，从而为联合治疗优化药物搭档选择。方法：使用了全人源抗CD47单克隆抗体SRF231、magrolimab以及小鼠单克隆抗CD47抗体B6H12。通过定制的Hoechst/Annexin V、精准医学技术BH3 profiling以及标准实验技术——流式细胞术、siRNA和CRISPR Cas9遗传操作、Western blotting和免疫组织化学，评估了包括凋亡、自噬和坏死性凋亡在内的多种细胞死亡机制。这些技术用于广泛的淋巴恶性肿瘤模型，包括弥漫性大B细胞淋巴瘤、伯基特淋巴瘤和T急性淋巴细胞白血病细胞系、患者原发性慢性淋巴细胞白血病细胞，以及淋巴样细胞系来源和患者来源的异种移植小鼠，以阐明CD47阻断的细胞死亡机制并确定联合治疗的最佳药物搭档。结果：我们证明了抗CD47抗体SRF231、magrolimab和B6H12通过激活RIPK1/MLKL/坏死性凋亡通路，消除了多种体外和体内淋巴恶性肿瘤模型中的肿瘤细胞。此外，BH3 profiling技术区分了两种不同的淋巴恶性肿瘤模型，它们在与SRF231联合使用时对BCL-2抑制剂venetoclax的反应不同；一种突出了SRF231诱导的坏死性凋亡和venetoclax诱导的凋亡在特异性依赖BCL-2生存的模型中的有效且独特机制，而另一种则暗示venetoclax在不依赖BCL-2生存或对venetoclax治疗无反应的模型中与SRF231联合是适得其反的搭档。结论：总的来说，这项研究揭示了通过激活坏死性凋亡来靶向CD47的一种新的非经典细胞死亡机制，并为进一步评估CD47阻断与或不与凋亡诱导剂联合用于合适淋巴恶性肿瘤患者的治疗策略提供了证据和依据。