质膜通道TRPM4介导免疫原性治疗诱导的坏死

几种新兴疗法主要通过诱导坏死来杀死癌细胞。由于坏死能激活免疫细胞，揭示抗癌治疗诱导坏死的分子驱动因素可能为增强免疫治疗效果提供方法。为了鉴定坏死相关基因，我们进行了一项全基因组CRISPR-Cas9筛选，针对诱导坏死的临床前药物BHPI进行负向选择，并使用ErSO进行了后续实验。筛选鉴定出瞬时受体电位M亚型4（TRPM4），这是一种钙激活、ATP抑制、钠选择性的质膜通道。对BHPI和ErSO产生耐药性的癌细胞表现出TRPM4的显著下调，而TRPM4的重新表达恢复了对ErSO的敏感性。值得注意的是，TRPM4敲除消除了ErSO诱导的小鼠乳腺肿瘤消退。支持TRPM4在坏死中的广泛作用，TRPM4敲除逆转了由其他四种不同的诱导坏死的癌症疗法诱导的细胞死亡。ErSO诱导了预期性未折叠蛋白反应（a-UPR）过度激活、长期坏死性细胞死亡以及损伤相关分子模式（DAMPs）的释放，这些DAMPs激活了巨噬细胞并增加了单核细胞迁移，所有这些都被TRPM4敲除所消除。此外，TRPM4的缺失抑制了ErSO诱导的细胞体积增加和ATP耗竭。这些数据表明，ErSO触发了a-UPR的初始激活，但TRPM4介导的钠内流和细胞肿胀导致渗透压应激，从而维持并传播致死的a-UPR过度激活。因此，TRPM4在维持致死性a-UPR过度激活中发挥关键作用，该过程介导了多种诱导坏死疗法的抗癌活性。