人子宫内膜上皮类器官的基底外侧分泌物影响基质细胞蜕膜化

Basolateral secretions of human endometrial epithelial organoids impact stromal cell decidualization

作者信息Harriet C Fitzgerald, Andrew M Kelleher, Chaman Ranjit, Danny J Schust, Thomas E Spencer
PMID36821428
发布时间2023-04
DOI10.1093/molehr/gaad007

摘要

子宫腺体及其分泌物对子宫内膜容受性、囊胚着床、基质细胞蜕膜化以及胎盘发育具有重要影响。月经周期中腺体功能的变化主要受类固醇激素雌激素(E2)和孕酮(P4)调控,但也可受基质来源的外在因素调节。通过人类子宫内膜上皮类器官系统,转录组与蛋白质组分析揭示了类器官对类固醇激素和前列腺素E2(PGE2)的特异性响应。值得注意的是,P4与PGE2可调控类器官蛋白的基底外侧分泌,尤其是半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(CST3)、丝氨酸蛋白酶抑制剂A家族成员3(SERPINA3)以及斯钙素1(STC1)。其中CST3(而非SERPINA3或STC1)能够减弱基质细胞在体外对类固醇激素和PGE2的蜕膜化反应。这些发现证明子宫腺体来源的因子可影响基质细胞蜕膜化过程,这对女性妊娠建立和生育力具有重要启示。

实验方法

产品清单

名称品牌货号
杜氏改良Eagle培养基:营养混合物F-12培养基Gibco11320-033
胎牛血清Sigma-Aldrich--
抗生素-抗真菌剂Gibco15240-062
细胞滤网----
基质胶----
12孔板----
Tissue-Tek O.C.T.包埋剂Sakura Finetek USA--
Reveal Decloaker抗原修复液Biocare MedicaRV1000M
正常山羊血清ThermoFisher Scientific01-6201
Alexa Fluor 488偶联二抗Jackson ImmunoResearch112-545-143
Alexa Fluor 594偶联二抗Jackson ImmunoResearch111-585-144
Hoechst核染料InvitrogenH3570
Leica DM5500 B正置显微镜Leica--
Direct-zol RNA MiniPrep Plus提取试剂盒Zymo ResearchR2070
DNase IQiagen79256
iScript RT SupermixBio-Rad1708841
SsoAdvanced Universal SYBR Green SupermixBio-Rad--
片段分析仪Advanced Analytical Technologies--
Illumina TruSeq mRNA建库试剂盒Illumina--
Illumina NextSeq 500测序仪Illumina--
Pierce 660 nM蛋白测定法Pierce Chemical--
Pierce C18吸头Pierce--
Bruker timsTOFPRO质谱仪Bruker--