【笃玛实验科普-260003】ELISA实验三大"刺客"样本篇-乳糜血

上一期我们了解了溶血对ELISA实验的影响，接下来我们来讲第二个刺客-乳糜血。

 

1-首先，先来了解乳糜血是如何出现的。一般，会有生理性原因和病理性的原因。肥胖和在体检前的高脂饮食，食物中的甘油三酯在小肠中被分解重组为乳糜微粒，这些乳糜微粒进入血液，形成乳糜血。而病理性的乳糜血，一般是因为糖尿病、胰腺炎、肾病综合症等疾病干扰了脂蛋白的正常合成、代谢，在长期服用干扰脂质代谢的药物后，也易出现乳糜血。

2-那么，乳糜血是如何影响ELISA实验结果的？最主要原因就是光学的影响，ELISA实验最后一步是用酶标仪来读取OD值，而乳糜血中悬浮的脂质颗粒，会引起严重的光散射，使得本底增高，造成假阳性结果。

3-第二个原因，酶标孔空间有限，乳糜颗粒本身体积较大且粘度也大，会挤压空间，阻碍酶标孔底的捕获抗体和目标抗原结合。

4-第三，脂蛋白颗粒有两亲性，会非特异性地和酶标抗体结合，且黏附在孔底孔壁这些地方，这样一来，就进一步增加了背景信号。

5-第四，如果待测抗原是脂溶性的，它就会和乳糜颗粒融为一体，也就是存在于脂相当中，存在在水相当中的待测抗原量就会变少，造成假性低值。

6-那么，我们如何来处理这些乳糜血呢？总结了三个点：高速或者超速离心、稀释、有机溶剂萃取。高速或者超速离心，可以让乳糜颗粒漂浮在上层，此时我们将脂质层轻轻拨开，区下层澄清液体即可。

7-用合适的样本稀释液，一般情况下，用ELISA试剂盒内配套的样本稀释液就可以，将乳糜血样本稀释到合适的浓度，可以减少乳糜颗粒对最终结果的影响，但抗原浓度同样也被降低了，这个方法适合轻度乳糜血的ELISA检测前处理。

8-最后一个，有机溶剂萃取，使用有机溶剂和乳糜血混合，震荡后离心，乳糜颗粒溶于有机相，水相则用来点样。此方法只适用于小分子或者脂溶性或极度稳定的分析物，且要保证回收率。

本期对乳糜血的了解就到这里，下期我们将会共同了解最后一个刺客-含异嗜性抗体样本，敬请期待！