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大鼠抗核抗体(ANA)ELISA试剂盒

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  • 2025年07月09日
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    • 适应物种

      大鼠

    • 库存

      999

    • 供应商

      上海笃玛生物科技有限公司

    • 检测范围

      电询

    • 检测方法

      双抗夹心法

    • 应用

      科研实验

    • 标记物

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    • 样本

      体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆等

    • 规格

      96T

    大鼠抗核抗体(ANA)ELISA试剂盒

     

    以下是大鼠抗核抗体(ANA)ELISA 试剂盒的介绍:

    基本信息
    规格:常见为 48T 和 96T 两种,可根据实验需求选择。
    适用范围:用于体外定量检测大鼠血清、血浆及相关液体样本中的抗核抗体(ANA)浓度,仅供科研使用,不可用于临床诊断。


    检测原理
    一般采用间接法。将核抗原固定在酶标板上,加入待检测的大鼠血清或血浆样本,若样本中含有抗核抗体(ANA),则会与固定在板上的核抗原特异性结合。洗涤去除未结合的物质后,加入酶标记的抗大鼠免疫球蛋白抗体(如抗 IgG、IgA、IgM 等),它会与结合在核抗原上的 ANA 结合。再经过洗涤步骤,加入显色底物(如 TMB),在酶的催化下底物发生显色反应,颜色的深浅与样本中 ANA 的含量成正比。最后加入终止液终止反应,使用酶标仪在特定波长下测定吸光度,通过标准曲线计算出样本中 ANA 的浓度。


    试剂盒组成
    预包被板:已包被核抗原的酶标板。
    标准品:一系列已知浓度的 ANA 标准品,用于绘制标准曲线。
    酶标抗体:辣根过氧化物酶(HRP)或其他酶标记的抗大鼠免疫球蛋白抗体。
    显色底物:通常为 TMB 底物,在酶的作用下发生显色反应。
    终止液:用于终止显色反应,使颜色稳定以便于酶标仪读数。
    浓缩洗涤液:用于洗涤酶标板,去除未结合的物质,使用时需按比例稀释。
    样本稀释液:用于稀释样本,确保样本中的 ANA 浓度在检测范围内。


    样本要求
    血清:使用不含热原和内毒素的试管收集血液,操作过程中避免任何细胞刺激。收集血液后,3000 转离心 10 分钟,将血清和红细胞迅速小心地分离。
    血浆:可用 EDTA、柠檬酸盐或肝素作为抗凝剂。采集后,3000 转离心 10 分钟去除颗粒和聚合物。
    保存:如果样本收集后不及时检测,应按一次用量分装,冻存于 - 20℃,避免反复冻融。在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。


    操作步骤
    实验准备:从冰箱中取出试剂盒和样本,平衡至室温。准备好酶标仪、高精度加样器及相应枪头、37℃恒温箱以及蒸馏水或去离子水。将浓缩洗涤液放置室温并轻摇均匀,待结晶完全溶解后,按要求用蒸馏水或去离子水稀释配置成工作浓度的洗涤液。
    取出预包被板,根据实验需求计算并确定所需的板条数,将剩余微孔板放回铝箔袋密封,保存于 4℃。
    设置标准品孔、样本孔和空白孔。标准品孔各加不同浓度的标准品,样本孔中加入待测样本,空白孔加入样本稀释液。
    加入酶标抗体,用封板膜封住反应孔,置于 37℃水浴锅或恒温箱温育一定时间。
    弃去液体,在吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置一段时间后,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板多次。
    每孔加入显色底物,37℃避光孵育一段时间。
    每孔加入终止液,在规定时间内,使用酶标仪在特定波长下测定各孔的吸光度(OD 值)。
    以标准品的浓度为纵坐标,OD 值为横坐标,绘制标准曲线。通过样品的吸光度值和标准曲线计算出样品的相应浓度,再乘以相应稀释倍数,即为样品实际浓度。


    性能指标
    检测范围: 0.47ng/mL - 30ng/mL 。
    灵敏度:小于 0.29ng/mL 。
    特异性:对大鼠 ANA 具有较高的特异性,与其他相关抗体或蛋白的交叉反应极低。
    重复性:板内、板间变异系数通常均小于 10%,以保证实验结果的稳定性和可靠性

     

    上海笃玛生物科技有限公司

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