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刘胜富
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31 人阅读发布时间:2026-09-28 14:29
九月开学,不少研0的同学已经提前进组了。
进细胞房的第一课,师兄师姐通常会塞给你一株"好养的"贴壁细胞练手:换液、消化、吹打、计数、传代,一套流程行云流水。
但总有一天,你会遇到 SNU-5。
这株细胞在新手手里的翻车率高得惊人,而且翻车方式几乎一模一样:拿到手第一天,习惯性拿起移液器一顿猛吹,加胰酶消化,离心,计数,铺板——操作规范得能上教科书,然后细胞死给你看。
今天这篇,就带即将进实验室的你,提前认识这株著名的"三不"细胞:不让吹、不让消化、不让计数。
SNU-5是一株人胃癌细胞系。1987年,韩国首尔国立大学(Seoul National University,SNU就是这么来的)的Jae-Gahb Park团队建立了它,样本来自一位33岁亚洲女性的低分化胃腺癌腹水,1990年正式发表在 Cancer Research 上。
目前它在全球主要保藏于:ATCC(CRL-5973)、韩国细胞库KCLB(00005)、台湾BCRC(60213)、中国科学院细胞库(SCSP-5237)。
所以当你在文献里看到SNU-5,别以为是什么神秘代号——它就是"首尔大学5号细胞",一株根正苗红、用了三十多年的经典老细胞。

SNU-5最出名的标签,是 MET基因扩增。
正常人的MET基因只有2个拷贝,SNU-5有 8-9个。这导致MET受体大量表达、下游信号持续激活,细胞的生长繁殖高度依赖MET这条通路——也就是常说的"MET成瘾"。
正因如此,SNU-5成了 c-MET靶向药研发中最经典的药敏模型之一。做胃癌MET靶点、做靶向药物筛选、做耐药机制研究,SNU-5都是常客。你以后翻胃癌靶向治疗的文献,十有八九会和它打照面。
90%的肿瘤细胞系是贴壁生长的——细胞趴在瓶底,铺成一层。
SNU-5不。它在培养瓶里是悬浮的,而且一团一团地抱在一起。显微镜下看,像一串串葡萄:小团几个细胞,大团几十上百个细胞紧紧相拥,轻轻晃一下培养瓶,它们还会飘起来。

SNU-5人胃癌细胞系 货号:FH0932
注意,这个"抱团"不是污染,不是状态差,而是它正常的生长方式。
而且这个团抱得非常讲究:团里的细胞靠细胞间连接互相扶持,还共享彼此分泌的生长因子。换句话说,SNU-5是个"集体主义者"——你把它吹散成单个细胞,孤零零的单细胞反而很难活。对它来说,孤独是致命的。
理解了"悬浮成团"这个设定,下面的天坑你就懂了为什么是坑。
天坑1:手痒吹打。
养贴壁细胞传代时要吹打成单细胞悬液,这个肌肉记忆请对SNU-5删除。用力吹散细胞团,对它是巨大的机械损伤,被打散的单细胞会大量凋亡。
天坑2:上胰酶。
它根本不贴壁,不需要消化。胰酶对一团团没有防备的细胞是无差别攻击,纯属误伤友军。
天坑3:计数强迫症。
聚集成团的细胞没法准确计数,新手对着计数板数半小时,得到的数字毫无意义。SNU-5传代看的是团块密度和体积比例,不是细胞个数。
天坑4:全换液。
把上清全部弃掉?你倒掉的不只是旧培养基,还有健康的小细胞团和细胞分泌的生长因子。SNU-5要半换液。
培养基:IMDM + 20%胎牛血清。
这是ATCC、BCRC、中科院细胞库三家现行推荐完全一致的方案。为什么营养给这么足?因为IMDM本来就是为快速增殖、高密度培养的细胞设计的"营养餐":葡萄糖是普通RPMI-1640的两倍多,氨基酸、维生素浓度更高,还自带HEPES缓冲和微量元素硒。悬浮成团的细胞,团块中心的营养全靠培养基浓度硬撑,营养密度必须管够。
补充一个背景:它的"娘家"韩国KCLB至今还挂着1987年的老配方(RPMI-1640+10%热灭活血清,还额外加了HEPES强化缓冲)。老配方"能养活",但在扩增速度、团块活力、复苏存活率上,往往不如IMDM+20%。新手刚上手,别在培养基上省。
换液:每2-3天一次,半换液。
把细胞悬液轻轻收到离心管,低速离心,弃掉约三分之二上清,加回新鲜预热的IMDM完全培养基,轻轻打匀——注意,是让大团松散成小团,不是吹成单个细胞——再放回培养瓶。
传代:看密度分瓶。
培养液明显变浑、变黄加快、镜下团块又多又密,就按1:2或1:3分瓶。收集方式同上,按体积分,不计数。
状态判断:镜下看三件事。
健康的SNU-5:团块边缘圆润光滑、折光性好、碎片少。如果碎片明显增多、团块发黑发暗、培养液酸化异常快,先查培养基和血清,再想操作问题。
冻存与复苏:
冻存用完全培养基+5% DMSO,程序降温后转液氮;复苏时37℃快速融化,离心去掉DMSO后种回IMDM+20%,接种密度宁可高一点——它喜欢"热闹"。
SNU-5这株细胞特别有意思:它像一个社恐但极度抱团的团队——你不能把它拆散,不能让它饿肚子,更不能拿管贴壁细胞的那套规矩来管它。但一旦摸对了脾气,它长得又稳又快,MET实验的数据也漂亮。
新手养细胞最大的坎,其实不是手笨,而是"想当然"——把第一株细胞的经验,套到所有细胞身上。SNU-5就是专门来打破这个想当然的:先读懂细胞的脾气,再动手。
富衡生物提供SNU-5细胞(货号FH0932),现行培养方案与ATCC、中科院细胞库完全一致:IMDM + 20% FBS + 1%双抗,悬浮成团培养,每2-3天半换液、1:2传代。细胞到手后的培养、传代、冻存有任何疑问,欢迎随时联系我们的技术支持。
祝各位研0的同学,细胞房之旅开局顺利,细胞永不污染。🌟
参考资料
Park JG, et al. Cancer Research. 1990;50:2773-2780(SNU-5建系原始文献)
ATCC CRL-5973 (SNU-5) 产品页及培养方案
中国科学院细胞库 SCSP-5237 说明书;台湾BCRC 60213;韩国KCLB 00005
Cellosaurus: CVCL_0078
本文为富衡生物细胞培养科普内容,具体培养条件请以所用细胞的官方说明书及实际细胞状态为准。
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