上海富衡 | 深入剖析人前列腺癌细胞 Lncap：起源、特性与培养要点

一、Lncap 细胞的起源与背景

Lncap 细胞系建立于 1977 年，源于一位 50 岁白人男性前列腺癌患者的左锁骨上淋巴结转移灶。这个细胞系具有重要的研究价值，因为它保留了雄激素受体（AR），并且对雄激素刺激呈现出依赖性生长的特性。这与临床上一部分前列腺癌患者的病情特征相呼应，即癌细胞的生长和增殖在一定程度上依赖雄激素。通过对 Lncap 细胞的研究，科学家们能够深入探究雄激素信号通路在前列腺癌发生、发展中的作用机制，为开发针对雄激素依赖型前列腺癌的治疗方法提供理论基础。
Lncap 细胞还具有一些特殊的生物学行为，例如其生长相对缓慢，这与某些前列腺癌在体内的发展进程较为相似。这种特性使得研究人员可以在体外模拟前列腺癌的缓慢进展过程，更细致地观察癌细胞的变化和对各种干预措施的反应。

二、Lncap 细胞培养的注意事项

1. 培养基的选择与配置

Lncap 细胞通常在含有 10% 胎牛血清（FBS）的 RPMI - 1640 培养基中培养。RPMI - 1640 培养基富含多种氨基酸、维生素和糖类，为细胞提供了全面的营养支持。而 FBS 则为细胞带来了生长必需的生长因子、激素和其他生物活性物质。需要注意的是，FBS 的质量对 Lncap 细胞的生长影响显著。不同批次的 FBS 可能在成分和质量上存在差异，因此在大规模培养之前，建议对不同批次的 FBS 进行预实验，通过观察细胞的生长速度、形态变化以及存活率等指标，挑选出最适合 Lncap 细胞生长的批次，并尽量保持使用同一批次，以确保实验结果的稳定性和可重复性。

此外，为了防止微生物污染，培养基中常添加青霉素和链霉素，终浓度一般为 100 U/mL 青霉素和 100 μg/mL 链霉素。但要注意，抗生素的使用可能会对细胞产生一些潜在影响，如改变细胞代谢或基因表达等，所以在进行一些对细胞生理状态要求较高的实验时，需谨慎评估抗生素的使用必要性。

2. 培养环境的控制

温度和气体环境对于 Lncap 细胞的生长至关重要。细胞应在 37℃的恒温培养箱中培养，这是模拟人体内部的温度环境，有利于细胞内各种酶促反应的正常进行。同时，培养箱内的气体环境需维持在 5% CO₂和 95% 空气的比例。CO₂的作用是与培养基中的碳酸氢盐缓冲系统共同维持培养基的 pH 值在 7.2 - 7.4 之间。如果 CO₂浓度过高或过低，都会导致培养基 pH 值的波动，进而影响细胞的生长和代谢，甚至可能引起细胞死亡。

此外，培养箱内的湿度也应保持在较高水平，以防止培养基蒸发导致成分浓缩，影响细胞生长环境的稳定性。

3. 细胞传代与日常观察

Lncap 细胞的生长速度相对较慢，当细胞汇合度达到 70% - 80% 时，就需要进行传代操作。传代时机的把握非常关键，若汇合度过高，细胞之间相互接触抑制，营养物质消耗加快，代谢废物积累增多，会影响细胞的生长状态；而过早传代则可能导致细胞数量不足，影响实验进程。

在传代过程中，首先要用胰蛋白酶 - EDTA 溶液对细胞进行消化。消化时间要严格控制，一般在 3 - 5 分钟左右，消化过度会损伤细胞表面的蛋白质和膜结构，影响细胞的贴壁和生长能力；消化不足则细胞难以从培养瓶底部脱离。消化完成后，应及时加入含有血清的培养基终止消化，轻柔吹打细胞，使其均匀分散，然后按照合适的比例接种到新的培养瓶中。

日常培养过程中，要定期使用倒置显微镜观察 Lncap 细胞的形态和生长状态。正常的 Lncap 细胞呈上皮样形态，贴壁生长，细胞形态较为规则，边界清晰。如果发现细胞形态发生改变，如出现细胞皱缩、变圆、脱落等现象，或者培养基颜色变黄（提示 pH 值降低，代谢产物积累），则可能意味着细胞生长出现了问题，需要及时调整培养条件或采取相应的措施。