上海富衡 | 鼻咽癌细胞株5-8F：高转移研究的优选模型

一、鼻咽癌：中国南方高发肿瘤的科研挑战

鼻咽癌（Nasopharyngeal Carcinoma, NPC）是一种与EB病毒（Epstein-Barr virus, EBV）密切相关的头颈部恶性肿瘤，具有显著地域聚集性（如中国广东、广西地区）。其早期症状隐匿，约70%患者确诊时已发生淋巴结或远端转移，临床亟需解析其转移机制及开发靶向治疗方案。

研究痛点：

• 原代鼻咽癌细胞体外培养难度高，易失去体内转移特性。
• 现有细胞模型（如CNE2、HONE1）转移潜能有限，难以模拟临床进展。

  二、5-8F细胞株：鼻咽癌高转移研究的“金标准”

  5-8F细胞株是鼻咽癌研究领域公认的高侵袭、高转移模型，由上海富衡生物科技有限公司提供ATCC标准化的细胞资源及配套实验方案。

  1. 细胞起源与特性

  • 建株背景：1980年从一名58岁中国男性鼻咽低分化鳞癌患者的肺转移灶中分离建株，经裸鼠体内传代筛选获得高转移亚克隆。
  • 分子特征：EBV相关性：EBER阳性（EB病毒编码小RNA），LMP1（潜伏膜蛋白1）高表达，驱动NF-κB通路持续激活。基因突变谱：TP53突变（R280K）、EGFR扩增、VEGF高分泌，与临床晚期患者基因特征高度吻合。
  • 功能特性：体外侵袭性：Transwell实验显示穿膜细胞数为CNE2的3-5倍（基质胶模拟基底膜）。体内转移能力：裸鼠尾静脉注射后，肺转移灶形成率>80%（4-6周），适用于转移机制动态追踪。
  • 2. 培养优化方案（富衡生物推荐）

  5-8F为贴壁生长细胞，需严格控制以下条件以维持其高转移特性：

  • 培养基配置：基础培养基：RPMI 1640（89%）添加剂：10%胎牛血清（FBS）、1%非必需氨基酸（NEAA）、1 mM丙酮酸钠、2 mM GlutaMAX。可选功能强化：添加10 ng/mL EGF或5%条件培养基，增强细胞侵袭性。
  • 传代管理：细胞密度达80%-90%时，使用0.25%胰酶-EDTA消化2-3分钟，传代比例1:3至1:5，每周2次。避免过度融合导致细胞间连接增强，侵袭能力下降。
  • 冻存与复苏：冻存液：90% FBS + 10% DMSO，密度1×10⁶ cells/mL，程序降温后液氮保存。复苏后48小时内避免功能实验，确保细胞状态恢复。
  • 3. 科研应用场景
  • 转移机制解析：EMT调控网络：通过TGF-β1诱导上皮-间质转化（EMT），检测E-cadherin下调及Vimentin上调。转移相关基因筛选：CRISPR-Cas9敲低LMP1或EGFR，观察肺转移灶数量变化。
  • 放化疗抵抗研究：顺铂敏感性：构建梯度浓度顺铂处理模型，分析IC50值及凋亡相关蛋白（Caspase-3、Bcl-2）表达。放疗耐受：通过克隆形成实验（2-6 Gy X射线照射）评估DNA损伤修复能力。
  • 靶向药物开发：EGFR抑制剂测试：奥希替尼（Osimertinib）或吉非替尼（Gefitinib）对细胞增殖及迁移的抑制作用。免疫治疗联用：PD-1抗体联合放疗对裸鼠移植瘤生长的协同效应评估。
  • EB病毒致癌机制：利用shRNA沉默EBNA1（EB病毒核抗原1），研究其对端粒酶活性及基因组稳定性的影响。

  三、5-8F的差异化优势

  相较于其他鼻咽癌细胞模型，5-8F具备以下核心优势：

  1. 高转移重现性：裸鼠肺转移率>80%，显著高于CNE2（<30%），更贴近临床转移进程。
  2. EBV驱动明确：LMP1高表达为研究EBV介导的免疫逃逸提供天然模型。
  3. 多组学数据支持：已公开基因组、转录组及蛋白组数据（GEO数据库：GSE12452），助力机制深度挖掘。

  四、富衡生物技术支持与服务体系

  上海富衡生物科技有限公司为科研用户提供5-8F细胞研究全流程解决方案：

  • 细胞资源：提供ATCC认证的5-8F细胞株（STR鉴定报告）、专用培养基（IM-NPC-5-8F）及转移模型构建试剂盒（含基质胶及裸鼠实验指南）。
  • 实验辅助：基因编辑服务：CRISPR-Cas9靶向EBV基因（如LMP1）或宿主基因（如TP53、EGFR）。体内外转移模型：Transwell侵袭实验包、裸鼠肺转移活体成像技术（IVIS系统）。
  • 售后保障：提供细胞支原体检测及转移功能验证服务（周期7个工作日），确保数据可靠性。