上海富衡 | 小鼠乳腺癌细胞4T1细胞

小鼠乳腺癌细胞4T1是研究三阴性乳腺癌（TNBC）和转移机制的核心工具，其源于BALB/c小鼠的自发性乳腺肿瘤，具有高度侵袭性和多器官转移特性。作为人Ⅵ期乳腺癌的动物模型，4T1细胞在注射至小鼠体内后，可自发形成原发灶并向肺、肝、淋巴结、脑等远端器官转移，且无需摘除原发肿瘤即可观察转移进程。以下从生物学特性、研究应用及培养要点三方面解析其重要性。

一、生物学特性与模型优势

4T1细胞呈贴壁生长，形态为上皮样，推荐使用含10%胎牛血清（FBS）的RPMI 1640培养基培养。其核心优势包括：

1. 高致瘤性与转移性：相比其他乳腺癌模型（如EMT-6或4T07），4T1能形成可见的转移灶，且转移细胞团可少至单个细胞，通过抗6-硫鸟嘌呤特性实现高灵敏度检测。
2. 临床相关性：其生长特性与人类三阴性乳腺癌高度相似，尤其适用于研究肿瘤微环境、免疫逃逸及转移信号通路（如STAT3、MMP2/9）。

二、科研与转化医学应用

1. 转移机制解析：4T1模型揭示了上皮间质转化（EM和Src通路在转移中的作用。例如，抑制STAT3通路可减少癌细胞迁移和侵袭。
2. 药物筛选平台：天然产物研究：迷迭香提取物合成的铁纳米颗粒（Rosemary-FeNPs）及生姜提取物均显示出对4T1细胞的显著细胞毒性。
3. 纳米药物开发：紫杉醇固体脂质纳米粒（DTX-loaded SLNs）能抑制4T1的肺转移，疗效优于传统剂型。
4. 免疫治疗探索：通过敲除免疫相关基因（如TLR4），可研究肿瘤微环境对治疗响应的影响，为免疫检查点抑制剂提供实验基础。

   三、培养要点与注意事项

   1. 传代与消化：细胞需在80%汇合度时传代，推荐1:6-1:8比例。消化时间较长（5-15分钟），建议分步消化：首次消化后收集脱落细胞，剩余细胞二次消化以确保单细胞悬液。
   2. 污染与碎片控制：培养中常见黑点（细胞代谢产物或碎片），可通过PBS润洗或低速离心清除。避免使用反复冻融的血清以减少蛋白沉淀。
   3. 冻存与复苏：推荐使用含10% DMSO的无血清冻存液，程序降温后存于液氮。复苏时需快速融化并离心去除冻存液，以维持细胞活性。

   4T1细胞凭借其高度转移性和临床相关性，成为乳腺癌研究的核心模型。从机制解析到药物开发，其在基础与转化医学中均展现不可替代的价值。随着基因编辑技术（如CRISPR/Cas9）和活细胞成像的应用，4T1模型将继续推动精准肿瘤治疗的发展