上海富衡 | 3T3-L1细胞

小鼠前脂肪胚胎成纤维细胞3T3-L1是研究脂肪代谢与相关疾病的经典细胞模型，其源于Swiss小白鼠胚胎成纤维细胞NIH-3T3的克隆亚株，具有稳定的传代能力和定向分化为成熟脂肪细胞的特性。该细胞在基础研究和药物开发中占据重要地位，以下从特性、分化机制及应用领域三方面展开论述。

一、生物学特性

3T3-L1细胞呈贴壁生长，形态为成纤维细胞样，推荐使用含10%小牛血清（CS）的DMEM培养基培养。需注意：胎牛血清（FBS）会加速细胞增殖并导致自发分化。其生长特性具有接触抑制性，当细胞密度达到80%-90%时需及时传代，避免过早分化。传代比例建议1:3-1:4，胰酶消化时间控制在2-3分钟，以维持细胞活力。

二、成脂分化机制

通过“鸡尾酒诱导法”，3T3-L1可分化为成熟脂肪细胞。经典方案分四阶段：

1. 接触抑制：细胞长满后静置2天，退出生长周期；
2. 诱导阶段：加入含IBMX（0.5mM）、地塞米松（1μM）和胰岛素（1-10μg/mL）的培养基，激活PPARγ等转录因子，启动脂滴合成信号通路。
3. 分化维持：换用仅含胰岛素的培养基促进脂质积累；
4. 成熟阶段：更换常规培养基，持续培养至脂滴大量形成（通常需8-10天），油红O染色可见典型红色脂滴。
   研究显示，联合PPARγ激动剂（如罗格列酮）可显著提升分化效率，脂滴生成量较单一诱导剂增加超300%。

   三、科研应用价值

   1. 代谢疾病研究：作为肥胖、糖尿病等疾病的体外模型，用于解析脂质合成、胰岛素抵抗等机制。例如，研究发现脂肪细胞外囊泡可通过调控β细胞存活参与糖尿病进程
   2. 药物开发平台：用于筛选降脂药物或代谢调节剂，如噻唑烷二酮类药物（TZDs）的效应验证
   3. 跨物种研究：禽类研究中添加油酸可替代传统诱导方案，拓展模型适用性。

   四、注意事项

   培养时需控制细胞密度（40-60%汇合度为宜），铺板不均易导致分化差异。分化过程中换液需轻柔，避免脂滴脱落；冻存建议采用含10% DMSO的无血清冻存液，-80℃梯度降温后转入液氮。

   3T3-L1细胞凭借其稳定的分化能力和广泛的应用场景，已成为脂肪生物学研究的核心工具。随着诱导方案的优化（如PPARγ激动剂联用），其在新药研发和代谢机制解析中的价值将进一步凸显。