上海富衡 | 导致细胞完全培养基看起来有些混浊的原因

细胞完全培养基出现混浊可能由多种原因引起，以下是常见原因及对应的分析和建议：

微生物污染

细菌或真菌污染：这是最常见的混浊原因。细菌污染时培养基会明显浑浊，可能伴随异味；真菌污染则可能出现丝状、絮状悬浮物。

支原体污染：支原体污染通常不会立即导致明显混浊，但长期培养后培养基可能变浑浊或颜色异常（如pH值变化）。

• 立即显微镜观察是否有微生物（如细菌的杆状、球状形态，真菌的菌丝）。

• 取少量培养基接种到琼脂平板或肉汤中培养，确认是否有污染。

• 污染的培养基需彻底丢弃，相关实验器材灭菌，避免交叉污染。

细胞死亡或碎片

（该图来源网络）

细胞过度生长或死亡：当细胞密度过高、营养耗尽或受到毒性物质影响时，大量细胞死亡并释放内容物（如DNA、蛋白质），导致培养基混浊。

细胞碎片积累：传代时消化过度或细胞刮擦损伤可能产生碎片，悬浮在培养基中形成混浊。

• 检查细胞状态，观察是否有大量漂浮死细胞或贴壁细胞异常皱缩。

• 及时传代，避免细胞密度过高。

• 优化消化条件，减少细胞损伤。

培养基成分沉淀

血清或蛋白析出：血清中的脂蛋白、纤维蛋白原等成分在低温储存或反复冻融后可能析出，形成絮状或颗粒状沉淀。

盐类或试剂结晶：培养基中的某些盐类（如碳酸氢钠）在pH值变化或温度过低时可能析出，导致混浊。

• 轻轻摇匀培养基，观察沉淀是否溶解。

• 若沉淀由血清引起，可将培养基在37℃水浴中温和加热并轻轻晃动，促进溶解。

• 避免培养基长时间暴露在低温环境中，配制时确保成分充分溶解。

操作不当或试剂问题

配制过程未混匀：培养基中添加的血清、抗生素等试剂未充分混匀，可能导致局部混浊。

试剂变质：过期的血清、缓冲液或添加剂可能因成分降解而产生混浊。

• 配制培养基时充分混匀，确保所有成分溶解。

• 检查试剂保质期，避免使用过期或储存不当的试剂。

总结排查步骤