注意你的细胞正在被悄悄地消耗

接种与传代：在细胞培养的起始阶段，需要将细胞从原有的培养体系接种到新的培养器皿中。在这个过程中，由于操作手法、移液工具等因素，会有一定数量的细胞残留在原容器或移液器具上，从而造成细胞损失。 

换液：换液的目的是为细胞提供新鲜的营养物质，并去除代谢废物。在倒掉旧培养液和加入新培养液的过程中，部分贴壁不牢固的细胞可能会随旧培养液被移除，导致细胞数量减少。

冻存与复苏：当需要长期保存细胞时，会将细胞进行冻存。在冻存过程中，细胞会经历降温、添加冻存保护剂等步骤，这些操作可能会对细胞造成一定的损伤，导致部分细胞死亡。而在复苏细胞时，快速解冻的过程也可能使细胞受到应激，进一步损失一部分细胞。

营养物质缺乏：细胞的生长和代谢需要充足的营养物质，如葡萄糖、氨基酸、维生素等。如果培养液中的营养物质耗尽，而没有及时更换培养液，细胞会因缺乏能量和合成物质而生长缓慢甚至死亡。

代谢废物积累：细胞在生长过程中会产生各种代谢废物，如乳酸、氨等。这些废物在培养液中积累到一定浓度后，会对细胞产生毒性作用，影响细胞的正常生理功能，导致细胞死亡。

pH值变化：细胞培养需要适宜的pH值环境，一般在7.2 - 7.4之间。细胞代谢会产生酸性或碱性物质，导致培养液的pH值发生变化。如果pH值超出细胞所能耐受的范围，会影响细胞内酶的活性和细胞膜的稳定性，从而造成细胞损伤和死亡。

细胞培养基变黄

气体环境不当：细胞培养需要合适的气体环境，主要是氧气和二氧化碳。氧气是细胞进行有氧呼吸的必需物质，二氧化碳则参与维持培养液的pH值。如果培养箱内的气体浓度不稳定或不符合细胞的需求，会影响细胞的呼吸和代谢功能，导致细胞消耗增加。

微生物污染：细菌、真菌、支原体等微生物污染是细胞培养中常见的问题。微生物与细胞竞争营养物质，同时会产生毒素，抑制细胞的生长和代谢，严重时会导致细胞死亡。一旦发现细胞培养物被微生物污染，通常需要丢弃受污染的细胞，造成细胞的大量消耗。

交叉污染：在细胞培养过程中，如果操作不当，不同细胞系之间可能会发生交叉污染。交叉污染会改变细胞的生物学特性，影响实验结果的准确性。为了保证实验的可靠性，受污染的细胞往往需要被舍弃，从而造成细胞的损失。