RT-PCR步骤
RT-PCR的实验步骤: 取200mg组织,放到1.5ml EP管中,加入1ml Trizol剪碎。震荡30s。加0.2ml氯仿,剧烈摇动30s,室温3min……
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RT-PCR原理与实验技术
一、知识背景:1、基因表达:DNA——RNA——Protein单拷贝基因表达存在逐步放大机制,如一个蚕丝心蛋白基因——104个丝心蛋白mRNA(每个mRNA存活4d,可以合成105个丝心蛋白)——共合成109个丝心蛋白 。因此单拷贝基因的mRNA表达水平对于其功能水平的调控是非常重要的。2、PC ...
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逆转录(RT)实验步骤
逆转录(RT)实验步骤
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RT-PCR实验步骤
实验材料:水稻叶片的 RNA 。实验原理:目前 PCR 技术只能扩增 DNA 模板,对 RNA 模板不能直接扩增。mRNA反转录生成的 cDNA 可作为 PCR 的模板进行扩增,这种在 mRNA 反转录后进行的 PCR 扩增称为 RT-PCR 。 RT-PCR 比 Northern 杂交更灵敏,对 RNA 的质量要求较低,操作简便,它是在转录水平上检测基因时空表达的常用方法。本实验以水稻叶片 ...
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