常用的感受态有哪些?

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做克隆和蛋白表达,感受态选错,转化效率低、质粒不稳定、蛋白不表达。常用感受态可以分三类。

第一类,克隆用。DH5α最常用,适合常规质粒扩增和克隆;TOP10、JM109、Mach1也常用于克隆;Stbl3适合慢病毒/逆转录病毒载体,能减少重组,提高稳定性。

第二类,表达用。BL21(DE3)最通用,适合pET系列;BL21(DE3)pLysS适合毒性蛋白,能降低本底表达;Rosetta(DE3)补充稀有密码子tRNA,适合真核基因;Origami(DE3)利于二硫键形成;ArcticExpress(DE3)低温促溶,适合难溶蛋白;C41(DE3)、C43(DE3)适合毒性膜蛋白。

第三类,特殊用途。TG1常用于噬菌体展示,HB101用于常规克隆。按转化方式还分化学感受态和电转感受态,电转效率更高,适合大质粒或文库构建。

选感受态,先看目的:克隆扩增用DH5α,蛋白表达用BL21(DE3),慢病毒载体用Stbl3,毒性蛋白用pLysS或C41(DE3)。需要感受态和质粒,欢迎咨询淼灵生物。