ELISA实验和WB实验的区别 今天视频从实验原理、检测目的、适用场景三个点带大家了解两种实验的不同

ELISA VS WB：
一、原理不同
ELISA：核心原理是抗原抗体特异性结合，通过酶催化底物显色测量吸光度，其吸光度与抗原浓度成比例，通过标准曲线计算出目标蛋白的浓度。
WB：通过凝胶电泳分离混在样本中的蛋白，将分离开后的蛋白转移到膜上，通过一抗结合目标蛋白，二抗偶联酶或荧光素，通过显影判断样本中是否存在目标蛋白，通过条带位置确定蛋白分子量，条带的深浅用来比较不同样本中所含目标蛋白的相对含量。

二、检测目标和目的不同
ELISA：定量检测目标蛋白浓度，灵敏度高于WB，可以用来检测抗原含量较低的样本，易受杂质蛋白的干扰，假阳率较高。
WB：定性或半定量分析，特异性高于ELISA，提供蛋白质的分子量、多聚体形式、翻译后修饰等信息。

三、操作
ELISA：一步法最快90分钟即可完成96个反应，以每个样品3个技术重复为例，96孔板一次可以同时测定25个样品。操作简单，速度较快。
WB：一次实验耗时较长，通常需要过夜孵育，需要1-2天，需要经过蛋白提取、凝胶电泳、转膜、抗体孵育、显色多个步骤。操作步骤较为复杂繁琐，且需要保证每个步骤都不出现问题，否则将会影响最终结果。

四、适用场景
ELISA：适用于体液、细胞上清等可溶性样本，对样本处理要求较低，通常只需要离心去除杂质即可上机检测；组织样本也可以在加入PBS匀浆后离心取上清，再上机检测。适用于大批量样本的蛋白质定量分析。
WB：常用于组织或细胞裂解液样本，需确保提取所得蛋白的完整性和电泳条件的成熟，通常需要加入裂解液提取蛋白并变性后再进行电泳分离、转膜、孵育等后续步骤。在研究蛋白分子量、蛋白质表达分析、翻译后修饰研究、蛋白互作等基础研究时，常用到WB实验检测。