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孙玉琦
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悬浮细胞传代
悬浮细胞在培养基中悬浮生长，因此不需要胰酶消化脱落的过程，可以直接进行传代操作，方法简单，接下来就让我们一起看看悬浮细胞传代的具体操作吧！
悬浮细胞传代—实验准备
1、将移液枪、培养瓶、巴氏吸管、15mL离心管等物品提前放入生物安全柜中，紫外照射30min消毒灭菌;
2、完全培养基，预热至37度备用。
悬浮细胞传代—实验方法
主要有两种传代方法，换液传代法和离心传代法
1、本次以T25瓶培养的u2932细胞株为例，显微镜下观察细胞密度达到80%-90%时，进行传代，拍照并记录细胞状态。
2、培养瓶表面消毒后转移至生物柜安全中。
3、用巴氏吸管按1:2吸取细胞接种到新的T25瓶中，并补充等量的新鲜完全培养基，继续培养。
离心传代法—实验步骤
1、本次以T25瓶培养的u2932细胞株为例，显微镜下观察细胞密度达到80%-90%时，进行传代，拍照并记录细胞状态。
2、培养瓶表面消毒后转移至生物安全柜中。
3、收集细胞悬液转移到15mL离心管中。
4、800rpm， 离心 5 min，弃去培养上清。
5、使用新鲜的完全培养基重悬细胞。
6、移液枪吸取适量细胞悬液，接种到新的培养瓶中，再加入适量的完全培养基，最后转移至二氧化碳培养箱中继续培养。
