慢病毒包装服务

2019-02-28

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慢病毒（Lentivirus）是一类改造自人免疫缺陷病毒（HIV）的病毒载体，基因组为 RNA，对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力。慢病毒基因组进入细胞后，在细胞浆中反转录为 DNA，形成 DNA 整合前复合体，进入细胞核后，DNA 整合到细胞基因组中。整合后的 DNA 转录成 mRNA，回到细胞浆中，表达目的蛋白；或产生小 RNA。慢病毒介导的基因表达或小 RNA 干扰作用持续且稳定，并随细胞基因组的分裂而分裂（图 1）。

图 1 慢病毒作用机制

慢病毒与腺病毒、腺相关病毒、逆转录病毒载体相比，具有宿主范围广，免疫原性低，基因容量大，可以长期表达等特点。慢病毒主要用于难转染细胞的感染、稳转株的制备等。难转染的细胞主要包括干细胞、免疫细胞（如 DC 细胞）、肿瘤细胞等，此外，慢病毒还可以感染仓鼠胚胎制备转基因动物。

慢病毒感染细胞时，由于细胞的来源、代数和细胞状态等因素的影响，MOI 值在不同实验室也略有差异，下面我们提供公司部分细胞的慢病毒 MOI 感染参数，供实验参考（以下数据是细胞感染效率在 80% 细胞状态良好的情况下获得的）：

表 1 不同细胞的 MOI 值参考

细胞名称	细胞来源	MOI 值
A-375	人恶性黑色素瘤细胞	10
A549	人肺腺癌细胞	10
PANC-1	人胰腺癌细胞	10
NCI-H1299	人肺腺癌细胞	10
Saos-2	人骨肉瘤细胞	10
MDA-MB-231	人乳腺癌细胞	40
SW620	人结肠癌细胞	40
T24	人膀胱癌细胞	20
Ca Ski	人宫颈癌肠转移细胞	10
MG-63	人骨肉瘤细胞	50
…	…	…

和元上海慢病毒的生产和质控采取了国际学术界公认的标准流程，采用三质粒系统在 293 T 细胞中进行包装。所获得的病毒颗粒经过超速离心纯化，并通过 qPCR 对病毒基因拷贝进行滴定。一般情况下我们的慢病毒的滴度在 10⁸～10⁹ TU/ml，完全可以满足各类实验的使用要求。

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编辑： z翟某某来源：丁香园

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