荧光素酶检测进阶啦 ,6 重荧光素酶分析用上了吗?
2023-04-25 14:30点击次数:2948
关键词:我们做过荧光素酶报告基因检测,做过双报告基因检测,那 6 重报告基因检测排上日程了吗?他来了他来了,BMG LABTECH 带着 CLARIOstar PLUS 多功能酶标仪来了。CLARIOstar PLUS 光谱扫描功能帮助从 12 个荧光素酶中找到 6 个适合多重荧光素酶分析,能够探测 5 个细胞内信号反应和一个标准化对照。

首先,我们使用 CLARIOstar PLUS 发光光谱扫描功能对 12 种荧光素酶进行了表征,以确定光谱分辨多重信号的能力。图 2 显示了 6 种 D-LUC-(左)和 6 种 CLZN 为底物荧光素酶(右)的结果。

然后,根据光谱数据以及底物特异性和淬灭能力的结果,挑选出 6 种荧光素酶进行进一步测试。

最后,我们进行了验证测试,检测经验证的 siRNA 方法敲除多重萤光素酶测定的单一成分的直接和间接影响,结果发现除了靶基因敲除外,还可以观察到对其他成分表达的明显影响。

CLARIOstar PLUS 自带的 LVF 线性渐变滤光片光栅,不仅可以进行荧光光谱扫描,还具备独有的化学发光光谱扫描能力,是开发这种多重荧光素酶检测的理想工具。使用发光光谱扫描,可以对多种荧光素酶进行表征,以找到可以相互区分的组别。多色发射滤光片和试剂注射器的结合使用,帮助建立了一个完整的 6 重荧光素酶检测系统。6 重荧光素酶检测能极大地扩展了我们评估 siRNA、配体和化合物处理效果的能力,提供全面理解复杂生物系统所需的丰富数据。

首先,我们使用 CLARIOstar PLUS 发光光谱扫描功能对 12 种荧光素酶进行了表征,以确定光谱分辨多重信号的能力。图 2 显示了 6 种 D-LUC-(左)和 6 种 CLZN 为底物荧光素酶(右)的结果。

然后,根据光谱数据以及底物特异性和淬灭能力的结果,挑选出 6 种荧光素酶进行进一步测试。

最后,我们进行了验证测试,检测经验证的 siRNA 方法敲除多重萤光素酶测定的单一成分的直接和间接影响,结果发现除了靶基因敲除外,还可以观察到对其他成分表达的明显影响。

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