人白介素ELISA试剂盒检测前准备的工作有哪些?

2020-05-21 14:19点击次数:287

关键词:

1.请提前20分钟从冰箱中取出试剂盒,平衡至室温。

2.将浓缩洗涤液用双蒸水稀释(1:25)。未用完的放回4℃。从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结 晶,属于正常现象,可用40℃水浴微加热使结晶完全溶解后再配制洗涤液(加热温度不要超 过50℃,使用时洗涤液应为室温)。当日使用。

1.使用前将所有的试剂和标本缓慢均衡至室温(18-25oC),试剂不能直接在37oC溶解。

2.标准品(冻干品):每瓶标准品加入标准品稀释液1mL,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为1000pg/mL。准备7个稀释标准品的EP管,每个EP管中加入150μL的标准品稀释液,如图所示依次倍比稀释成不同的梯度,标准品稀释液(0pg/mL)直接作为空白孔。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。

4.生物素化抗体工作液:实验前计算当次实验所需用量(以100μL/孔计),实际配制时应多配 制100-200μL。使用前15分钟,以生物素化抗体稀释液稀释浓缩生物素化抗体(1:100)成工作 浓度。当日使用。

5.酶结合物工作液:实验前计算当次实验所需用量(以100μL/孔计),实际配制时应多配制 100-200μL。使用前15分钟,以酶结合物稀释液稀释浓缩HRP酶结合物(1:100)成工作浓度。 当日使用。

标准品稀释方法图例:(以500μL/管为例,也可根据实际用量来稀释,如150μL/管)

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