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病毒感染—细胞实验宝典

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问如何提高单细胞测序的成功率？

balalaLy

经过组织酶解消化产⽣的细胞碎⽚和游离RNA产⽣严重的背景⼲扰，操作过程中应尽量去除这些干扰因素

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问请问单细胞测序技术，用流式细胞术挑选完免疫细胞后，为什么再进行聚类，有的免疫细胞又被划分成其他种类的免疫细胞了。

whilt-shirt

在进行流式细胞术的数据分析时，圈门的方式和逻辑体现了我们对数据把控的准确性，以及对客观数据的理解性。所以建议在数据分析前一定要自己去搞清楚指标和指标的关系，再来按照一定的逻辑进行圈门才会获得比较客观严谨的结果。首先我们要知道，通常展示的结果大部分的时候都只是流式结果的一小部分，比如我们对一个细胞进行双染，流式的结果信息就有4个，即这群细胞双染的双阳群1个，双阴群1个，单阳群2个；那3染呢？即三阳1

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问怎样实现单细胞测序数据最大化

迟C迟

单细胞数据分析的第一步就是分亚群（当然前期肯定是需要先做数据预处理的），通过样本比较发现新的细胞亚群或比例差异显著的亚群。亚群分好之后最重要的一步（也是最难的一步）就是对亚群进行细胞类型注释了。我们会结合细胞类型marker基因、细胞类型注释软件和文献数据做比对的方法综合进行注释。第二步：寻找marker标志，根据自己实验数据的分类亚群，找每一个亚群特异表达的marker基因。如果某个亚群只在疾病

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问单细胞测序怎么样最大程度的减少误差呢？要从哪里方面做呢？

whilt-shirt

样本准备原则（1）建议使用宽枪头重悬，以减少对细胞的损伤；（2）每次移液前先混匀细胞悬液，然后从管中部吸取；（3）所有环节都最好在无菌环节下操作、使用无核酸酶的试剂、减少移液步骤以及当可能损伤细胞的时候尽量使用宽枪头等。此外，可用一次性转液管去除离心后的上清液，以减少细胞沉淀的干扰；（4）取样的时候最好设置两个重复，对每个样品计数 2 次，即共计 4 次计数；（5）弃上清时候注意不要破坏细胞沉淀；

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问单细胞测序如何学习分析

彭彭彭文

分亚群，第二步，寻找疾病mαrKer标志物，第三步，功能研究

3 回答679 围观

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