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问
想用流式分巨噬细胞，需要怎么处理组织？
土井挞克树
可以从PBMC中通过阴选试剂盒分离较纯的、有活性的单核细胞。也可以用CD14、CD64和CD192作为人单核细胞的特异性标志物通过流式分选出单核细胞。原代人单核细胞可以在体外培养，需要注意的是，在血清或M-CSF存在的5天内，培养的单核细胞将开始分化为巨噬细胞。单核细胞以粘附和非粘附细胞的混合形式生长，粘附细胞的比例取决于培养基和刺激因子。除了原代单核细胞，人外周血单核细胞系THP-1也常用于对单
1 回答
603 围观
问
流式检测CD4T细胞分型，想用胞膜表面标记物染色请问大家都用哪些标记物呀
Dr_劉医生
看你具体是什么细胞亚群，不然太多了，常用的CD4染色的表型有CD183 , CD194 ， CD294, CD196 或CD161；不同表型和亚群可以看图表，非常详细；
3 回答
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问
流式细胞术中的死细胞怎么去除
土井挞克树
低浓度的DAPI溶液可去除流式细胞术中的死细胞
3 回答
575 围观
问
流式分选出的细胞活力怎么样？
huarenqiang5
分选出来的细胞在正常培养基中当然能够正常存活了，如果培养基不达标时就不能存活和培养了
2 回答
1035 围观
问
请问下大家用流式细胞仪时候有没有这种情况呀，我第一遍采集是这样，后面震荡重新采集又正常了
bamboopiggy
上流式第一步就是要成单细胞悬液，否则什么样的结果都可能出来
1 回答
509 围观
问
流式小白：做流式的最少细胞数量是多少啊？24和48孔板可以做吗？
juyue2010
5x10^5个，24孔板，长满应该够了，看你什么细胞
2 回答
5586 围观
问
免疫细胞流式分析，含量少的亚型怎么检测呢？
txs900416
看楼主使用的是什么活化模型，一般th1介导的模型就容易染出th1。此外，最好要用pma/ion/bfa联合处理细胞4-6h，才能让t细胞发挥出最大潜力，容易检测到th1/2/17/treg的分化
1 回答
554 围观
问
破膜固定处理后的细胞还能上流式细胞仪进行细胞分选吗？死活染料能区分在破膜固定前的死活细胞吗？
小小袋袋
细胞分选和破膜固定理论上不冲突，我觉得死活染料可以区分，但需要注意荧光是否会影响后续实验
3 回答
2003 围观
问
流式实验的时候FCblocker 和FVD活性染料哪一个应该先放。
peaceful13
先染FVD死活，因为这个是染料会跟蛋白或者抗体结合，所以需要在无蛋白的缓冲液进行染色，Fcblocker主要成份刚好就是蛋白或者抗体，所以需要先染死活
2 回答
1195 围观
问
流式图如何射门，原理是什么
txs900416
一般采用级联门圈门策略，首先圈出目标细胞群体，然后圈出单细胞群体，再通过标记的阴性和阳性选择出目的细胞。例如血液中的T细胞，先圈出PBMC门，再圈出单细胞门，再通过cd45+和cd3+圈出t细胞即可
3 回答
960 围观
问
流式细胞术实验中，荧光弱常见原因是什么？怎么解决？
明査日月
前带现象 抗体稀释过度 细胞数量过多 抗原本身表达弱
3 回答
2418 围观
问
请问流式细胞术单抗直接荧光需要几种对照？
dxy_zutyknhe
先确定你用的直标抗体的荧光染料，然后确定该抗体的来源总属，选择相应的同型对照
12 回答
317 围观
问
怎样用流式细胞仪来鉴定小鼠BMDC？
丁香实验
检测小鼠BMDC主要是从形态学和细胞表面分子两方面来鉴定我做的时候就做了普通光镜下形态、电镜（扫描和透射），另外检测了小鼠BMDC表面的共刺激分子如CD86、CD11、CD80。还做了MHC II类分子的检测，还有MHCI类分子的检测，这些分子在DC表面都不是特异存在的，在巨噬细胞、淋巴细胞表面也有表达，所以目前并没有非常特异性的方法检测你的细胞一定就是DC，但是从形态和表面分子的检测结合来看，效
1 回答
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问
细胞流式分选得率不够
bamboopiggy
如果得率不够，你又不能提高你的处理方式的话，只能提高细胞量。
2 回答
409 围观
问
干细胞纯度用流式细胞仪怎么看
bamboopiggy
如果cd90和cd105双阳的。就是在右上象限，然后有个百分比的读值可以直接看出来
1 回答
433 围观
问
流式细胞术如何进行荧光补偿？
天一湖医者
使用标准微珠确保细胞仪的性能符合规格。 利用未染色的样品设置荧光通道电压。调节前向和侧向散射光，以便清楚界定细胞群。在后续分析中，死细胞、细胞团以及细胞碎片应被排除。应尽可能避免使用发射光谱重叠程度较高的某些荧光染料组合（例如，APC 和 PE-Cy5）。各荧光染料都需要补偿对照，并且应包含阳性和阴性细胞群。设置补偿时应单独使用补偿对照。 阳性细胞群的亮度应至少与实验中包含的其他细胞的亮度相当，并
3 回答
1426 围观
问
流式细胞仪跑出的图流式细胞图分群不明显怎么办？
Ethan2007
又仔细查了下资料，分群不明显还有可能是抗体的荧光强度较弱，可选用强荧光的抗体。另外，在染色时，抗体的加入量不合适也可能造成分群不明显。可以考虑做一个浓度梯度，以找到合适的抗体浓度。
3 回答
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问
流式细胞学检测时细胞有很多碎片
丁香清香
流式细胞学细胞碎片应该是死亡细胞
3 回答
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问
流式细胞术检测GFP转染的效率相关问题
amethyst2003
一般的话流式检测的细胞数是10000－20000，具体看参数设置了，建议用PBS重悬，一般是不需要固定的，检测所用为第一通道，单色荧光不难的，做一次就知道了。好运哦
1 回答
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问
蛋白印迹实验和流式细胞术都是使用抗体来检测细胞内靶标物质，两者如何选择
whilt-shirt
根据需要吧，但是最好两者都做，这样结果更可靠
3 回答
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