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问
Nrf2 这个蛋白怎么做出来?
qinsiman
Nrf2蛋白存在量很少,所以要看你是否用了正确的抗体和跑胶浓度,一般用sant cruz的抗体,且上样量为30-40 ul左右
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问
标准曲线怎么做不好?
冬天的棒棒糖
最好用排枪同时加显色液,样品浓度太高,都饱和了
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问
小鼠脑部组织切片用什么方式比较好?
新天夏
如果是免疫荧光的话建议冰冻切片,如果是普通免疫组化使用石蜡切片更好。并建议在上述站友的基础上,在30%蔗糖脱水前使用20%蔗糖脱水一次,效果更好,待样品沉底,可以换30%蔗糖
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问
细胞膜做免疫荧光要用什么特异性抗体
长颈鹿叔叔
一抗标记IF的。IHC-P的意思是石蜡切片免疫组化技术,一般情况下石蜡能做的,冰冻也能做,你组织切的是什么就不能选择什么来源的,比如大鼠组织切片,一抗来源就需要选择兔或者是小鼠,二抗是根据一抗来源选择的,一抗是兔的就选XX抗兔,一抗是小鼠的二抗就选XX抗小鼠。
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问
卵巢癌造瘤用哪种细胞最容易成瘤?
leechuan1989
一般采用小鼠腋部或皮下中undefined10^6细胞
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问
有用胎盘组织做RT-PCR的吗?
yhy_yun
你可以试试其他内参,例如U6等,胎盘组织和人体其他组织的成分是不一样的。
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问
细胞免疫荧光用 4% 多聚甲醛固定,1% BSA 封闭,这两步可以不要吗?省去会有什么影响?
stellaff
“加荧光标记抗鼠抗体(第二抗体)工作液20ul,混匀振荡置4℃/30分钟(时间不能超过)。”请问这步必须是4℃/30分钟吗?时间不能超过,如果超过了会有什么影响?” 二抗不一定就是4℃ 30分钟,我们经常采用室温下避光孵育1小时,这样也可以得到较好的效果。细胞免疫荧光是需要固定的,根据目的蛋白的不同可以选择多聚甲醛或者丙酮,一般固定20分钟。封闭也是需要的 可以减少非特异性背景。
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问
beta-actin条带灰度一致,但是宽度不一致?
我是金博士
说明上样量不均匀。
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问
请问标注的 primer B 和 C 一般需要多长的片段呢?
我是金博士
这个还是比较容易的,你要考虑下多设计几对引物,你可以搜索下overlap PCR引物设计注意事项,蛮多的。
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问
如何区分组织切片中不同种类的细胞,可以用标记方法区分吗?如可以,具体怎么操作?
chahaoran
HE 染色,大致区分,可从形态看出一些。比如,淋巴细胞,核大,核浆比大,核上有个小缺口。等等,组织学上有的。免疫组化技术,免疫荧光技术,可通过特异的表面分子标记来区分。
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问
mRNA 的 realtime PCR 怎么操作?引物怎么加?
王建勇
就是逆转录的时候要用特异性RT引物,其他的合普通的realtimePCR一样的。
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问
如何测定特定细胞的周期时间?
ljjl8310
没有诀窍吧?只能每天进行检测吧?
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问
链霉素的毒性反应及解救实验中可以用其他钙剂替换氯化钙吗?
我是金博士
没有特殊说明不要,同时看下氯化钙的作用。
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1624 围观
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问
为什么经过酶切过后胶回收分子量变大了?
3202 围观
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问
怎样用试剂提取人尿中的 microRNA,或者有没有好的试剂盒可以推荐?
萧莣苼
在Google scholar中找了了相关的盒子 看到有 Norgen的urine microRNA purification kit ,你可以也找找看吧
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1066 围观
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问
为什么我曝光的结果胶卷是黑的条带是亮的?这是内参的条带?以前有人出现这样的结果吗?
908 围观
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问
灌胃时为何采用温水?
yuanwuping1987
体内环境温度会影响药物的ADME
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问
分子量27kd的 NGF的显色时间
971 围观
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问
封闭液的机理?
我是金博士
根据的就是相似相溶,不相似不相溶,封闭液,一般选异丁醇,实在不行,也可选乙醇。
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问
细胞冻存和复苏实验相关问题
lchoxy520
800转,3min, 离心管里加5-8ml培养基。
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