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问
qpcr用水代替模板上机,结果仍然有曲线,是引物的问题还是被污染了?
bamboopiggy
可能是引物二聚体,也可能是水被污染了,这个要更换其中一个进行判断
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问
PCR溶解曲线虽然为单峰,但峰看起来有点宽说明什么?
bamboopiggy
说明你的 引物不特异,有两个size差不多大小的产物产生
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问
荧光定量PCR的基线,是怎么确定的呢?
bamboopiggy
基线就是一开始基本没有读值的那些线啊,你说的应该是读CT值得那个threshold 线吧,那个就是斜率最大得地方,的一条线,现在基本由机器自己去判断了
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问
我做PCR实验,有关引物的问题?
bamboopiggy
如果不加模板也能扩增出目的条带,就是说明引物或者你加进去的东西中的某一样污染了
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问
wb实验跑完结果还不错,但是发现中间有个泳道没有加样,我出图的时候可以把中间那个剪切掉吗?这算不算做假图呢?
秋秋欣欣
可以把中间泳道剪掉,重新显影。
3 回答
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问
自己制胶跑出来经常歪歪扭扭,怎样才能把胶跑的非常漂亮?
bamboopiggy
不能急,一定要把胶混匀,且彻底凝固后,再用
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问
为什么提高大分子量蛋白的转移的时候,小分子量蛋白会丢失一些哪?什么原因?
bamboopiggy
小分子量的蛋白跑的比大分子量的快,如果为了得到更多得大分子量蛋白,会是小分子量得蛋白穿过膜,丢失了
3 回答
515 围观
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问
WB实验目的蛋白空白,但是marker很明显,为什么?
bamboopiggy
marker明显至少转膜是转过去的了,会不会是条带位置不对?
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2158 围观
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问
跑wb出现这种情况,是怎么回事?没有条带,全是黑点点……
秋秋欣欣
是不是转膜的时候,膜活化之前被污染了。
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问
SYBR GREEN I染料需要严格避光吗?
bamboopiggy
不用那么严格,就是加好板子以后,如果不能立刻上机,最好避光保存。加板子的时候不用
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问
制作划痕实验 细胞密度可以是多少为合适?
bamboopiggy
大概80-90%的细胞融合度,然后划痕后,记得换液
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2288 围观
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问
荧光定量qPCR的重复性好吗?
bamboopiggy
复孔是需要的,如果一个板跑不开内参和目的基因,可以分两个板跑,但是要求时间间隔不能超过一周,并且必须用同一台机器
6 回答
850 围观
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问
怎样可以让人源性星状细胞LX-2细胞能长快一点?加用细胞因子TGF-β刺激会有效果吗?或者加大培基的FBS总量?
bamboopiggy
用进口血清,如果长的太慢,可以考虑提高血清浓度到20%
3 回答
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问
RNA的提取时260\230
bamboopiggy
可能你提取的rna的浓度低,导致260/230比值的差异小,从而值不好
4 回答
3367 围观
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问
lncRNA使用shRNA敲低后使用什么方法回补效果比较好?
秋秋欣欣
pcDNA过表达就行,普通的也不会有影响
2 回答
841 围观
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问
做pcr的时候曲线没有峰值,出来的数每个孔差异很大,怎么解决
bamboopiggy
1.确定机器是好的,2,确定引物能用 ,3加样的枪和枪尖要match
3 回答
416 围观
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问
A549细胞到底是如何形态
bamboopiggy
人非小细胞肺癌的细胞,是由D·J·Griad通过肺癌组织移植培养建系,源自于一位58岁白人男性
5 回答
1163 围观
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问
请教Proteome profiler array是什么分析
汤姆卜丽波
Proteome Profiler即血管生成蛋白芯片抗体,芯片为同时检测单个样品中多个分析物的相对水平提供了一种快速、灵敏而又经济的工具。这种芯片的使用不需要特殊的仪器,也不需要进行多个免疫沉淀或者Western blot实验。每个芯片在设计时都采用精心挑选的捕获抗体,并在硝酸纤维素膜上重复点样两次。这些膜与实验样品以及包含生物素化检测抗体混合物共同孵育,随后加入辣根过氧化物酶(HRP)偶联的链亲
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1539 围观
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问
ros荧光探针
汤姆卜丽波
根据你的荧光,重新设置一下激发光长度
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问
WB蛋白孵育
汤姆卜丽波
试着缩短一点一抗的孵育时间,多洗几遍看会不会好一点
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