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qpcr结果_溶解曲线
bamboopiggy
感觉是加样不稳,或者是cDNA的质量有问题。
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问
壳聚糖有还原性吗?会还原二价铜离子吗?
Eason老歌迷
没有。但是它壳聚糖可以吸附铜离子。
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问
如果circRNA的引物既可以扩增出环状RNA,又可以扩增出线性RNA
Eason老歌迷
RNase R检测并非是必须的,但可以作为一个很典型的实验证明和鉴定circRNA。RNase R主要用于circRNA的鉴定和富集实验,需要根据具体的实验内容和目的决定是否进行RNase R消化。如果是以qPCR进行定量检测,一般可以不做RNase R检测,即不需要对circRNA进行富集(线性RNA被消化)。
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问
病例组和正常人的qPCR结果数据应该怎么处理呢
bamboopiggy
感觉你看的这两种方法都有问题,应该是每个样本的Δct减去这个均值得到ΔΔct。然后计算得到2的ΔΔct,然后可以用t-test进行组间比较就可以。
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问
流式分析求助
Eason老歌迷
7AAD就行。上下相差很接近。
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问
子宫masson
Eason老歌迷
masson染色对固定要求比较特别,最好用Bouin固定,最好是石蜡切片,形态好,特备是肾组织,一般多采用2um。如果已使用甲醛类固定剂,建议制片后进入Bouin液再固定过夜,这样片子更易着色。
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问
变异链球菌究竟是好氧菌还是厌氧菌?为什么文献里和菌种购买网站不一样?
天一湖医者
一般来说,变异链球菌属于厌氧菌。
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问
请大佬看一下qpcr amplification plot曲线
天一湖医者
一是扩增信号太弱,经系统矫正后,就产生这样抖啊抖的线,小 V 建议大家提高模板浓度重复实验。二是仪器本身的问题,可能在扩增过程中仪器出现了波动或者本身该检测孔出现了异常。
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问
阿霉素大鼠尿蛋白差异太大怎么办?
Eason老歌迷
个人感觉是你的鼠尾注射没有操作好。说到底尾静脉注射技术就像投篮一般,有的时候蒙一下能进,或者手感热的时候连续进球,但其他时候还是不够稳定。如果想要提高成功率还是需要在找对方法的情况下,经常练习手感。至于姿势问题大家不必拘泥,我也只是把对我而言最合理的姿势分享给大家,各位在练习的过程中也可以微调,毕竟无论教科书般的投篮姿势还是端尿盆儿,只要能进球就好。
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问
诱导小鼠体内巨噬细胞的极化
Eason老歌迷
具体参看这篇文献,Physical Confinement in Alginate Cryogels Determines Macrophage Polarization to a M2 phenotype by Regulating a STAT-Related mRNA Transcription Pathway。
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问
细胞DNA的提取一般用什么方法?
bamboopiggy
看你的实验目的,有专门提细胞genomic DNA的kit,如果是单纯做个genotyping,可以用鼠尾裂解液。
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问
fish技术是基因扩增吗?
天一湖医者
是的,荧光原位杂交技术(FISH)是目前临床病理诊断中一种重要的辅助技术,主要用于基因的扩增、易位和融合,在淋巴造血系统和软组织肿瘤中应该较为广泛。
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问
请问大神们,我的病毒不含药筛靶点,想通过荧光抗体染色后流式分选,那细胞结合过荧光抗体,功能还正常吗?我的是Jurkat 细胞
Eason老歌迷
没问题吧,功能应该都和之前一样正常,给你看看流式的原理图。
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问
我想问一下,双CART的构建是构建两种病毒还是构建一个包含两个基因的病毒好?有老师说两个病毒的话会影响转染效率
Eason老歌迷
后一种更好。确实如你老师所言,两个病毒的话会影响转染效率。
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问
请问有人在用CAR慢病毒转染Jurkat 细胞吗?为什么转染之后扩增这么难,还死了一大片。
Eason老歌迷
正常,这跟细胞上病毒受体表达的多寡以及细胞的抗病毒能力有关,这两个原因一般无法克服。给提供几个常见的解决方法。一个是加助侵染试剂。二是浓缩病毒,4摄氏度,10K蛋白截留柱离心浓缩,提高病毒滴度后在感染,可以提高感染阳性率。三是分选阳性细胞,一般情况下,慢病毒感染Jurket、THP1这种有免疫能力(指的是分子免疫抗病毒能力)的细胞,基本上不可能做到100%感染,如果你感染以后有分选标签,做一个流式
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问
A260/A280 、A260/A230 有何意义?
bamboopiggy
260/280代表的是样品在260nm处的浓度,和280nm处浓度的比值,一般在1.8-2.0之间比较好,低了代表有蛋白质对核酸的污染,260/230代表的是有机溶剂的污染
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问
spss方差分析的题怎么做
Eason老歌迷
成对样本统计量 均值 N 标准差 均值的标准误 对 1 治疗前 122.1000 10 11.31813 3.57911 治疗后 112.1000 10 16.17577 5.11523 成对样本检验 成对差分 t 均值 标准差 均值的标准误 差分的 95% 置信区间 下限 上限 对 1 治疗前 - 治疗后 10.00000 11.95361 3.78006 1.44890 18.55110 2.
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问
WGCNA分析时,软阈值是如何选择的?
Eason老歌迷
具有生物学意义的是R2>0.8 部分会提高阈值到0.9 同时保证连通性较高,没有高于0.9的 直接用0.8的吧 取4计算看看结果好坏。
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问
请教各位大神!请问96孔板培养细胞为什么会出现以下情况呀!?
秋秋欣欣
感觉像是你细胞之前消化后没有吹散
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问
高尔基染色
Eason老歌迷
你可以看看说明书。一般动物不能灌注,(灌注会造成阴性结果)直接处死取脑,水洗一下,放入1,2混合液,(24小时换液),避光,室温14天。
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