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实验问答

25,289,500 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

问请问有什么好的线粒体内参抗体VDAC1推荐？

土井挞克树

线粒体定位蛋白：VDAC1（抗电压依赖性阴离子通道蛋白）、COX IV（细胞色素C氧化酶）等

3 回答1459 围观

问pcr扩增实验条带很大不是目的条带？

huarenqiang5

可能是电泳的时候参数设置问题，其次就是特异性检验，把引物放到ncbi里面去blast一下，看看引物特异性如何，要是特异性不好，需要重新设计引物。

3 回答1979 围观

问求求大神帮忙解决贴膜法测量抗菌材料的抗菌性为什么连对照组也一个菌落没培养出来

高山云初

首先，要确认下是不是样品的问题，某些检测样品经过高温杀菌之后，本身就没有太多菌，所以没有菌落也是正常的。其次，过程操作有没有问题，比如用于检测的稀释液使用时是不是温度太高，或者倒培养基时培养基温度过高，亦或者培养基质量问题、培养箱温度偏低等。最后，检测时选择的稀释度过高，也可能导致没有菌落生长。总之出现这种情况需要从各个方面进行分析。其实首先就应该确认样品本身，很多检测样品检测平板不长菌落也是正常

3 回答893 围观

问想问一下大家，审稿人说的这个是啥意思，怎么改呢？

huarenqiang5

ors的范围过小，导致差异不明显。

3 回答598 围观

问关于PCR的CT值问题咨询

sswei

CT值为小于35，处于正常值，可使用的。

3 回答494 围观

问方差不齐时韦尔奇显著但塔姆黑尼均不显著

huarenqiang5

建议忽略方差不齐看LSD结果即可。

3 回答3459 围观

问小分子蛋白（10KD）WB实验电泳液中不加SDS是可行的吗?如果不加SDS，那电泳液的配方是？

huarenqiang5

小分子蛋白电泳液中不需要加SDS。

3 回答1343 围观

问请问一下做单B细胞技术的大佬，我做巢式pcr看文献是p出抗体可变区，恒定区去掉，为什么不能连恒定区一起p呢？求解答🙏🙏

土井挞克树

恒定区不需要做pcr，后续直接结合抗体就可以

3 回答439 围观

问请教各位大佬们，小鼠的视网膜提取RNA浓度一般为多少？

sswei

视网膜算一个样本提取RNA后，提取的浓度一般为350±100ng/ul

3 回答1323 围观

问玉米抗氧化酶活性测定：样品研磨后加入缓冲液离心提取上清液，离心的过程中，温度升高到了45度，请问一下还能否继续做实验，酶活性如何

sswei

温度过高,酶的空间结构就会发生改变,从而使酶活性降低甚至失去活性;但低温只能使酶活性降低,而不能使酶失去活性,随着温度的升高,酶的活性可逐渐恢复。温度升高到了45度,玉米抗氧化酶活性渐渐恢复

3 回答590 围观

问请问有没有特定类型银屑病小鼠造模的方法？比如脓疱型银屑病，红皮银屑病等？

sswei

目前，银屑病小鼠模型主要采用两种方法建立：一种是基因敲除或突变法，例如K14- IL-4 transgenic mice和K14-TNF-α transgenic mice等；另一种是利用物理或化学刺激法诱导发生银屑病样皮炎，例如IMQ、DNFB、PGA和IL-23等。

3 回答1086 围观

问戊巴比妥钠用0.45um的过滤器过滤可以吗，给兔子静脉注射用的

sswei

给兔子静脉注射用的戊巴比妥钠用0.45um的过滤器过滤可以

4 回答526 围观

问请问WB时出现这种单泳道背景特别黑是什么原因呀？图1。其他的条带是整个背景都很黑，用5%牛奶，5%BSA，和10%牛奶都试过了

周末也要努力呀

增加封闭时间和洗涤次数。也可能是抗体不行了，重新配置。还有配牛奶的时候提前配置摇匀冰箱里放一会再封闭

5 回答3922 围观

问常规pcr扩增实验问题

李亚彪111

个人愚见，左边引物设计不合理，右边引物有杂交

3 回答462 围观

问组织铺片免疫荧光，鬼笔环肽染factin，只有中间一部分染上了，请教大家讨论一下什么原因呢？

周末也要努力呀

只中间染上周围没有上色是因为抗体太少在片子上没有铺均匀。染的时候注意平铺在表面，最好摇床过夜。

4 回答881 围观

问mcao小鼠造模，体重在25-30g，连着三只都感觉有阻力了，用的北京西浓的线栓，可是都没有梗，请问怎么根据体重算插入深度啊

sswei

插入深度约在2cm附近,至略有阻力为标准

4 回答825 围观

问噬菌体文库构建和淘筛需要单独的实验室吗，需要哪些仪器设备？

土井挞克树

冰箱，pcr相关设备，离心机，还有超净工作台等

3 回答499 围观

问冰冻切片SA-β-gal和核固红染色，用水性封片剂封片拍照发现组织表面覆盖一层杂质，什么原因如何避免

RYX艳艳

做冰冻切片免疫组化染色前要用PBS冲洗几次，要保持玻片的干净无污染。

4 回答1040 围观

问H9C2细胞的 Myh7、ANP、DKK2基因RT PCR的引物序列？

周末也要努力呀

1. Myh7（肌球蛋白重链7）： - 前向引物：5'-ATGAGCGAGGAGGAGGAGGA-3' - 反向引物：5'-TTAGAGGTCAGTGGTGGTG-3'2. ANP（心房钠尿肽）： - 前向引物：5'-ATGGCTGCTCTCTGCTCTG-3' - 反向引物：5'-TTAGAGGTCAGTGGTGGTG-3'3. DKK2（Dickkopf 2）： - 前向引

3 回答421 围观

问友友们，想预测一下趋化因子CCL20的信号通路，用KEGG或者GO应该怎么操作？实验步骤是什么？

周末也要努力呀

1. 访问KEGG数据库（https://www.genome.jp/kegg/）或GO数据库（http://geneontology.org/）。2. 在搜索栏中输入CCL20或其它相关的关键词，如"chemokine CCL20"。3. 在搜索结果中找到与CCL20相关的通路或功能注释信息。4. 进一步分析相关通路或功能注释信息，了解CCL20在特定信号通路中的作用和调控机制。

3 回答670 围观

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