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问
WB核蛋白和胞浆蛋白可以分开跑吗还是必须在一块胶上面跑哇
土井挞克树
可以分开跑,W B实验相对来说操作自由度高。
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问
悬浮细胞转染以后需要换液吗
bamboopiggy
这个取决于你用的什么转染方式啊,如果用lipo2000,要换
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问
maldi-tof-ms质谱分析求助
土井挞克树
最好更换基质,这种情况产生的峰不确定最好更换基质
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问
WB转膜结束后25kd以下的地方总出现粉红色染料印记,请问是怎么回事?另外如何提高心脏组织蛋白提取质量?
土井挞克树
有可能是抗体交叉反应,说明抗体纯化不足。
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问
请教小鼠坐骨神经损伤模型(SNI)相关问题
土井挞克树
SNI小鼠模型包括结扎坐骨神经三个分支中的两个(胫神经和腓总神经),而腓肠神经保持完整的。
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问
结直肠癌小鼠模型构建
土井挞克树
你是要比较模型构建方法的差异吗?如果是那么你的方案是可行的。
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问
Trizol法提取活细胞RNA,离心后,中间层离到管壁上是怎么回事
junyong151
目标分子在上清中,只要确保整个操作过程中样本没有被污染即可,中间层离到管壁上应该是和离心过程有关。
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问
请问具体的oc43扩毒方法是什么?这个病毒解冻方式是37度解冻,还是4度解冻呢?能反复冻存吗?反复冻存影响大吗?
土井挞克树
个人觉得缓慢解冻比较好,4度解冻
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问
冠状病毒OC43种细胞上,变浑浊了,是细胞污染了吗,对照组没有变化!
土井挞克树
考虑使细胞污染了,可能是病毒有可能是其他微生物。
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问
有哪位大神知道,能表达TRPV3的结肠细胞株吗?
土井挞克树
你可以查一下MC-38这个细胞株。
1 回答
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问
narodrop怎么测蛋白浓度?
bamboopiggy
在nanodrop启动页面上,有测蛋白浓度的那个选项
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问
如何研究链霉菌代谢组学?比较基因组精简后各敲除突变株与野生型的代谢差异?
土井挞克树
首先确定基因与蛋白的关系,然后比较突变株与野生型的差异。
1 回答
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问
植物RNA提取260/230吸光值过低,只有0.08是什么原因?
土井挞克树
260/230比值偏小,是有盐污染,解决的办法是:在乙醇洗脱步骤时:1、75%乙醇,4℃,7500g/min,离心5min;2、倒掉乙醇,再加入75%乙醇,条件同上,做第二次洗脱(注意,这次EP管在离心机里的摆放方向与第一次相反,以便能更全面的洗脱);3、再次掉转EP管在离心机中的方向(不再加入乙醇),7500g/min,4℃,离心3min 后,用200μl的枪小心吸去乙醇(注意不要吸到管底的RN
4 回答
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问
dss小鼠结肠组织的这些细胞是什么
土井挞克树
这个细胞不像是炎症细胞,中性粒细胞和淋巴细胞比较少。
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问
请问各位大佬这样的曲线前面好杂乱是怎么回事啊
土井挞克树
有可能是有一些小污染,导致在起始方向存在误差。
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问
maldi-tof-ms质谱检测,红色是基质图谱,蓝色和绿色是样品图谱
土井挞克树
最好更换基质,这种情况产生的峰不确定最好更换基质
2 回答
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问
如何根据保守序列设计简并引物?
junyong151
设计简并引物至少需要上下游各有一个保守区域, 且两个保守区域相距50~400个氨基酸残基为宜, 使得PCR产物在150~1200bp之间,最重要的是每一个保守区域至少有6个氨基酸的保守区,因为每条引物至少18bp左右。若比对结果保守性不是很强很可能找不到6个氨基酸序列的保守区,这时可以根据物种的亲缘关系,选择亲缘关系近的物种进行二次比对,若保守性仍达不到要求,则需进行三次比对,总之,究竟要选多少序
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问
求助:WB条带背景太黑 是什么原因呀
balalaLy
marker转膜成功说明前面的步骤应该都没有问题,唯一不能确定的是你的蛋白有没有提取成功。另外,抗体4度保存一个月肯定不行了吧。你的实验从配胶的试剂到抗体都是有各种不确定性,作为新手菜鸟,这么操作你可能要走完所有的坑你才能做出比较漂亮的结果哦。建议你先借别人的可以用的蛋白和抗体跑一下。
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问
WB的样品蛋白浓度过低怎么办?
bamboopiggy
只能换大孔胶,但是你可以设一个每块胶上都有的标准品,然后读值的时候,都和这个标准品进行比较
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问
组化笔固定前画圈还是封闭后加一抗前画
灵枢天问
我们是敷一抗前画,保证抗体覆盖
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