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问
酶动力学参数,多底物双倒数作图
土井挞克树
一个酶促反应速度的倒数(1/v)对底物浓度的倒数(1/[S])的作图。X和Y轴分别是底物和浓度
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问
求助,荧光定量无CT值
juyue2010
可能是没有设置,在每一个循环收集一次荧光信号
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问
请问有微量建库的实验细节展示吗?cycle数如何该如何确定?
土井挞克树
我这里有微量建库的实验细节图,分享给你:
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问
有Elispot的实验细节展示吗?视频或是protocol分享
土井挞克树
我有Elispot的实验细节图
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问
请问流式检测凋亡,一般处理组与对照组的差异为多少,表明处理组有效率。
土井挞克树
要想知道处理组有没有意义,要学会看流式图。实验结果图通常有一维直方图、二维点图、等高线图、密度图等几种。由数据还可以做出标准曲线进行定量分析。
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问
免疫共沉淀IgG条带问题
土井挞克树
珠子少加点,wb抗体稀一点,曝光时间短一点。珠子抗体这些不要贪多,不然容易有非特异性
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问
标记红细胞内的酶,应该用什么荧光(激发,发射波长),以避开红细胞的自发荧光?
土井挞克树
红细胞内血红蛋白会产生自发荧光红细胞的自发荧光减少方法交联固定诱发。使用非醛类固定剂,比如冰乙醇,可有效降低交联固定而诱导的自发荧光。红细胞。动物组织取材固定前,先用PBS进行灌注。先进行预实验。检测自发荧光的波长范围,再选择与自发荧光荧光信号波长相差较大荧光信号。组织自发荧光淬灭剂。自发荧光淬灭试剂中的离子可通过碰撞方式,捕获自发荧光光源分子发出的电子,阻止该电子从激发态回归基态和能量释放,从而
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问
提蛋白不离心会有什么影响?
土井挞克树
提蛋白不离心的话杂质无法与样本分离,可能影响后续试验,比如破裂细胞就无法分离
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问
条带模糊或者出现污斑
申东熙老伯
污斑可能是在转膜前不小心碰到了活化后的膜,被污染了
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问
怎么用琼脂糖凝胶电泳检测trna?
土井挞克树
总rna电泳时,trna的泳动率才与分子量的对数呈线性关系,所以可以通过凝胶电泳检测
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问
NADPH从胞质进入线粒体基质的穿梭机制
土井挞克树
NADPH的穿梭机制是等价还原物的穿梭机制,给你发机制图
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问
现在有成熟的从石蜡组织标本中分离细胞上流式的技术吗
Dr_劉医生
大致就是先脱蜡处理,然后复水(这步最关键),解离(胃蛋白酶)、染色;流式中文网有个方案(见图),《石蜡包埋切片制备单细胞悬液的实验步骤》
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问
求助幽门螺杆菌造模
Dr_劉医生
确实如此,hp感染本身就是慢性病理改变,hp感染可能不影响肠化生和萎缩的严重程度,所以造模时间和成功率都不高。建议可以问问公司,有没有成熟的技术
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问
BV2细胞形态
whilt-shirt
看图片细胞状态还好,不过可以传代了
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问
求助 中性粒细胞分离
纵横捭阖DTOU
覆盖在分离液上的时候有没有分层存在,如果有的话考虑可能是小鼠全血太少了,覆盖的时候太快,缓冲进入下层的也会影响结果,就是一定要缓慢,看你的图分层不够干净,有红细胞混杂在上层。
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问
BMDC培养
Dr_劉医生
园友分享的改良版方案,供参考:1. 取小鼠股骨胫骨,小鼠要年轻!(6W-8W,以前用只一年左右的养出来外形也张牙舞爪,但流式检测没有CD11c表达,很奇怪啊;性别方面公母不限,经典版本说公的好,公的壮实,骨头大)。 2. 冲骨髓细胞,我冲出来的骨髓细胞永远没有文献上说的那样多,但不影响大局,我一次用两只,怕出意外少了细胞,论坛里有战友说不要混一起,我不知道具体原因,盼赐教。 3. 细胞计数,不去红
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问
凝胶层析可以分离血清蛋白吗?
小布丁瑶瑶
可以 首先琼脂糖凝胶可以排除,这是大孔凝胶,用于分子量较大的成分。
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问
细胞代数靠后会影响实验结果吗
我们会有以后的
时间推移慢慢的,细胞代性和细胞生物学特性都会有影响。
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问
hepg2细胞堆叠长了形貌发生了好大变化,这是细胞老化了吗?
hy-cell
保证培养基不干的情况下尽可能不动它,让它缓缓,长密点看看状态会不会恢复吧
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问
流式细胞术中出现非特异性染色除了自发荧光之外,还有哪些原因?怎么避免?
elabscience
除此之外,巨噬细胞、单核细胞等表面表达大量的FCR,会与抗体非特异性的结合,因此在对此类含有大量FCR的细胞进行抗体标记前需要先进行封闭。
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