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问
关于内皮细胞的肾病模型
土井挞克树
造模流程操作流程: 1. CBSA 和弗氏完全佐剂制备乳剂,尾根部免疫100ug. 2.等待2周。 3.每隔一天静脉注射400ug cBSA(一共免疫5次) 4.收集16个小时内小鼠尿样 5.测定尿样中的尿蛋白 注:Balb/c可能会发生过敏性休克。这种情况,第14天免疫50ug cBSA就可以,16-22天继续免疫400ug。
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问
什么细胞系表达α-syn?
土井挞克树
脑皮质神经元好胶质细胞表达明显。
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问
GEO转录组数据处理问题
土井挞克树
我感觉你可以尝试一下进行对数转换。
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问
悬浮细胞可以做transwell吗
huarenqiang5
Transwell不建议用悬浮细胞做。
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问
加IPTG诱导摇床培养时要不要用未加IPTG的一起摇床培养做对照?
huarenqiang5
建议设置未加IPTG的一起摇床培养做对照组进行对比分析,这样实验结果更有说服力。
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问
为啥泛素化酶UB的wb都是一大长条
bamboopiggy
因为检测的是所有发生泛素化的蛋白条带
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问
小鼠脑黑质立体定位注射
土井挞克树
1. 利用某些颅骨外面的标志(如前囟、后囟、外耳道、眼眶、矢状缝等)或其它参考点所规定的三维坐标系统,来确定皮层下某些神经核团结构的位置.注意:操作为大鼠上门齿卡入横杆,调节旋钮压紧鼻杆;将耳杆插入大鼠耳道,平衡调节左、右耳杆,使大鼠两耳间连线与耳杆在同一直线上,保证左、右耳杆的刻度位置相同后调节旋钮锁紧耳杆。大鼠固定完好的判断标准:鼻对正中,头部不动,提尾不掉,目测大脑放置水平(使颅骨水平)。2
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问
流式凋亡求助!!
bamboopiggy
选区,把不需要的细胞群给去掉。可以用。
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问
为什么加了蛋白酶抑制剂蛋白还是会降解呢
bamboopiggy
你加了蛋白酶抑制剂以后,收的蛋白是怎么保存的?有没有反复冻融?
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问
求助:Elisa试剂盒的批间差如何执行?
huarenqiang5
批间差:选取3个不同批次的试剂盒分别对低、中、高值定值样本定量测定,每个样本使用同一试剂盒重复测定8次,分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。批间差: CV<13%
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问
QP引物设计
bamboopiggy
一般问题不大,只要遵循了qpcr引物设计的原则,并且出来的melt curve是单峰,就可以用
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问
PCR电泳无扩增条带?
bamboopiggy
你用阳参了么? 1.扩增的酶有没有问题,2,模板有没有问题,3,加没加引物,4,扩增的程序,尤其是annealing temperature和extension time是否正确?
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问
未被污染的肝癌细胞及肝细胞
bamboopiggy
肝癌细胞系未被污染的有很多啊,MHCC97H hepG2,PLC/PRF/5,但是我查到的肝细胞系基本都是hela污染的。
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问
ELISA检测稳定性实验如何设计?
土井挞克树
ELISA检测稳定性实验如何设计?(1)正式实验时,应分别以阳性对照与阴性对照控制实验条件,待检样品应做一式二份,以保证实验结果的准确性。有时本底较高,说明有非特异性反应,可采用羊血清、兔血清或BSA等封闭。 (2) 在ELISA中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括以下几点。①固相载体的选择。许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管
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问
双荧光素酶报告基因
huarenqiang5
这个考虑是你操作不当所导致的。
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问
求助| Hela细胞生长特别缓慢应该如何处理?
bamboopiggy
如果血清和培养基相同,那大概率是你胰酶消化狠了。
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问
衣霉素用什么稀释?
仁心郎中1
衣霉素在水缓冲液中的溶解度很低。为了在水缓冲液中获得zui大溶解度,衣霉素应首先溶解在二甲基亚砜中,然后用所选的水缓冲液进行稀释。使用这种方法,衣霉素在1:3 DMSO:PBS(pH 7.2)溶液中的溶解度约为0.25 mg/ml
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问
用刺激物刺激细胞看某个蛋白表达量的时候,设计了对照组0h,1h,2h刺激,对照组细胞什么时候提蛋白?
bamboopiggy
按照你刺激的时间收啊,刺激0h的,就0h收,1h的1h收,2h的2h收。ctrl的,0h收就好。
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问
小白求助,请问size exclusion chromatography结果图怎么看呢
bamboopiggy
这个结果图是洗脱后的wb图,你可以看洗脱的时间和蛋白的大小
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问
复苏的293T细胞为什么24h大多呈圆形,48h观察也还是圆形的多
c_Yeats
慢冻速融,复苏时候培养基提前预热。低速离心去处冻存液或者可以直接加入预热培养基的培养瓶中。复苏状态不佳时细胞未展开触角,可继续培养,或者复苏新的。
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