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问
想请教一下细胞污染的问题。养了细胞的细胞瓶里培养基是有一次是黄色浑浊漂浮着头皮屑一样的东西,还有一次是粉色浑浊漂浮着头皮屑样的东
天一湖医者
细胞培养,黄色浑浊漂浮着头皮屑一般考虑是真菌污染。
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问
请问在启动子和里基因序列之间插入RBS序列,是直接将RBS序列设在引物上吗?这段插入的RBS能作为同源区域进行两段序列的重组吗?
天一湖医者
在启动子和里基因序列之间插入RBS序列,是直接将RBS序列设在引物上。这段插入的RBS可以作为同源区域进行两段序列的重组。
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问
高效液相色谱A泵流动相为负压是为什么?有啥影响?
土井挞克树
开始的时候仪器有自检,会抽流动相,有个反压,这个是正常的.
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问
各位老师 我想问一下NO荧光检测时 在P1里的细胞数都是2600个 可不可以比较 (没到一万个)
不懂欧洋
细胞数相同即可,不过还是建议多一点细胞,减少实验误差
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问
做免疫共沉淀时,IP组的igg泳道在对应的目的蛋白位置跟互作蛋白位置,跟IP组泳道同时都有条带,怎么解决? 求教各位大神
huarenqiang5
你这个主要考虑抗体原因导致显影出现了条带。
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问
PCR如何有效设计引物?
juyue2010
使用引物设计软件,primer5, primer3,或者从文献里查引物
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问
岛津20—A的高效液相怎么清洗自动进样器管路?仪器关闭状态下,流动相还继续流是为什么?接柱子的地方容易漏液怎么办?
huarenqiang5
使用的流动相应与仪器原保存溶剂能互溶,如不互溶,则先取下上次的色谱柱,照6.1.1-6.1.2的方法用异丙醇冲洗过渡,过渡完毕后,接上相应的色谱柱,换上本次使用的流动相,再按6.1.1顺序操作。色谱流路系统,从泵、进样器、色谱柱到检测器流通池,在分析完毕后,均应按5.1充分冲洗,特别是用过含盐流动相的,更注意先用水,再用甲醇一水,充分冲洗。漏液应请工程师或有经验的维修人员进行检查、维修。
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问
之前挑单菌落过夜培养后的菌液用甘油保存于-80℃,现在要做IPTG诱导的话,怎么做?
土井挞克树
最好是取解冻的甘油菌液于液体培养基过夜培养后,再去取菌液涂平板,这样得到的实验结果比较稳定。
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问
为什么我的内参会相差这么大?
c_Yeats
不同的样本用的内参是有差别的。心肌组织蛋白不建议用actin,蛋白定量以后统一上样量,市面上通用内参都不行的情况下,可以试试总蛋白量(TPS)作为内参。
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问
链霉菌泛素-蛋白酶体降解蛋白过程中需要维持一个铁稳态吗?
土井挞克树
需要固定时间向特定菌数的培养基中补充铁。
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问
请问有无投过journal of gastroenterology的老师?
Dr_劉医生
利益说明可以后续补交,而且在投稿时,系统也会让你勾选confilct of interest,问题不大
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问
求一份跑核酸变性Page的配方
c_Yeats
溶液配制(1)10×甲醛变性胶缓冲液配制(2000ml) NaAc.3H2O 13.6g,MOPS 83.6g,EDTA二水二钠 7.44g; 加DEPC蒸馏水1600ml,转子溶解至透明澄清; 调节PH至7.0, 容量瓶定容至2000ml,混匀至澄清透明。4℃放置备用。(2)10×甲醛变性胶loading buffer配制(RNA专用) 16 ul gelred +
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问
已知引物序列怎么寻找引物在目的基因中的位置?
土井挞克树
如果引物序列已知直接上基因网站NCBI上输入查询对比即可
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问
请问大家蛋白灰度值柱状图的bar值是怎么来的(如下图)?是三次重复实验吗?
土井挞克树
是的,一般重复三次,三次结果稳定具有参考意义,取平均值即可
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问
抗体染色后细胞荧光反而比未染色更低?
大草原的小灰驴
1.封闭的时间太短,导致非特异性染色或者内源性过氧化物酶活性反应。2.标记抗体染色的条件不合适,抗体浓度过高、pH值没调整好、洗过量的抗体不充分。3.光源的波长选择错误。4.试剂失效或者被污染。
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问
询问各位大佬怎么做标曲
Amor良
打开excel表格,选中数据区域,点击“插入”,点击“图表”右下角的小箭头。选择“X Y(散点图)”,选择第二项,点击“确定”,点击图形上的一个点,点击右键选择“添加趋势线”。勾选“显示公式”和“显示R平方值”,点击“关闭”,选择右侧图例,点击右键选择“删除”得到处理后的标准曲线。
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问
HR的计算问题
juyue2010
使用spas,做cox分析,会得到HR信息
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问
qPCR内参基因循环数在多少合适
申东熙老伯
在限定范围内当然是最好,但不在限定范围内要是做了几次都是这样也可以用。内参在15-20之间都可以。
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问
核酸探针结合的不是单链DNA吗,那杂交时不是双链DNA吗,探针怎么结合呀
genecreate
杂交前会做变性处理的 !!!!!
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问
双荧光素酶报告基因 circRNA与miRNA结合
genecreate
一般用的是ATCG 当然你也可以都试试
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