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问
对转染shRNA的细胞进行消化传代,会影响转染效果吗?
balalaLy
你是做瞬转的吧,最简单的是你用6cm盘做转染,24小时后消化铺两个12孔板,一个做划痕一个做pcr验证转染效率。
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问
有同学用过人髓核永生化细胞做过实验吗?跟原代的人髓核细胞相比有区别吗?
土井挞克树
原代髓核细胞比较稳定,一般不用髓核永生化细胞。
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问
大家用THP-1细胞做实验一般都在第几代内
土井挞克树
我一般是第五六代左右开始做实验。
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问
请推荐一下耳鼻喉生信+免疫组化实验的中、英文期刊?
Dr_劉医生
中文基本没有接收生信的期刊,可以试试英文的《ACTA OTO-LARYNGOLOGICA》、《ACTA OTORHINOLARYNGOLOGICA ITALICA》
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问
想要检测T淋巴细胞亚群如cd4、cd8、th17、treg的数量和比例,是不是一定得用流式?其他检测手段可以吗?比如elisa?
土井挞克树
Elisa不好,比例得不到,除了流式你可以跑免疫荧光,通过荧光表达来推算比例。
3 回答
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问
用24孔板做siRNA转染,提的rna非常少,能不能把两个复孔的细胞放在一起提取
土井挞克树
提取的rna少可以加大上样量,复孔板混合容易造成污染。
4 回答
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问
flowjo分析流式,如何扣除细胞自带的荧光啊
土井挞克树
可以做荧光补偿,把背景的自发荧光降低,减小影响
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问
WB封闭脱脂奶粉加多了,接近10%了,有影响吗
huarenqiang5
有影响,建议调整抗体的稀释比就可以了。
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问
怎么样才能去敲除尽量多的 TP53 蛋白
土井挞克树
可以先用特异性核酸酶剪切一下再敲除。
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问
R跑节点和异质性检验总是报错,求大神解答
Dr_劉医生
fisher scoring algorithm算法出错了,用code调整一下:res <- rma(yi, vi, data=dat, (control = list(stepadj = 0.5)))
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问
pcr 提取质粒,菌p
dxyc42u
看看pcr过程有没有问题,以前做的时候也是这种情况,最后发现是pcr操作过程有点问题
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771 围观
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问
logit分析只可以用stats分析么
dxyc42u
logit模型常用的工具有BIOGEME ,NlogitC,Stata,SPSS
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问
脂肪面积
dxyc42u
magej中数据分割,测出来体积,然后测得材料重量,是不是密度就出来了。如果ImageJ用的费劲,可以试试Avizo,Amira,Mimics,VG等专业的三维图形图像处理软件。
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626 围观
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问
样本量计算
dxyc42u
人样本一般至少30,动物一般至少10个.
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682 围观
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问
硫酸铵沉淀
dxyc42u
白色的!而且是加着加着,突然就都析出来了
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问
小鼠来源的骨髓巨噬细胞培养 腺病毒shrna转染
dxyc42u
我们实验室都在换液后加,效果也挺好
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897 围观
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问
目的是Cytoc和AIF胞浆和线粒体内比值,动物组织也能提胞浆和线粒体蛋白吗?
dxyc42u
可以选择细胞分离提取跑wb,动物只做它们的组化
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428 围观
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问
转化酒酿酵母感受态
dxyc42u
判断下是否转化成功?一般转化成功:平板出现乳白色单菌落,直径可达1 mm以上,判断为转化成功;如果平板出现一层菌落,或者菌落都太小,不能挑取单菌落,判断为转化失败。常见的失败多为筛选平板上没能长出任何菌落。
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问
可用于研究内质网应激的肺上皮细胞
dxyc42u
A549细胞是腺癌人类肺泡基底上皮细胞
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问
有什么方便快捷测反相色谱柱柱效的方法,测柱效进样之前也要冲柱子平基线吗
dxyc42u
测柱效进样之前我们一般是要冲柱子平基线
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