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问
求一份滑膜提原代的方案
Dr_劉医生
讲一下我自己操作的大致方法:细节可以结合自己的操作完善1. 取组织后剪碎,加入α-MEM洗3遍;2. 加入一型胶原酶(2:1)进行消化,常温120分钟,充分混匀。3. 半小时收集第一次细胞,过滤一次,然后2000rpm 离心6分钟后,取官底物质再次消化。4.一个小时收集第二次细胞,重复第3步的操作5.取细胞放入10%胎牛血清中,接种到培养皿培养,2天换液一次即可。
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问
TCGA求助
土井挞克树
说明TCGA目前没有用户上传这个基因。
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问
大鼠主动脉内皮细胞这样了,请问是咋回事
Dr_劉医生
除了染色背景有点杂,细胞基本没啥问题。主动脉内皮细胞形态本身就是扁平的多边形细胞,细丝是细胞之间的连接,完全不影响细胞生长。
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问
求 脊髓的MBP(髓磷脂碱蛋白)免疫荧光 染色图片
土井挞克树
脊髓的MBP(髓磷脂碱蛋白) 染色图片
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问
胶质瘤原代细胞培养疑难
土井挞克树
胶质母细胞瘤组织分离过滤,种植于DMEM+10%FBS培养基后,降低细胞密度。
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问
知道基因序列,如何寻找或筛选和此基因可能发生相互作用的蛋白因子?
土井挞克树
你可以在现有的基因库查dna与a蛋白的关系。
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问
靶向线粒体序列
土井挞克树
可以参考文章含线粒体靶向序列的载体及其构建方法和应用与流程
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问
meta分析双反正弦转换问题请教
土井挞克树
可以用双反正弦转换后做统计分析,然后转换后再画森林图
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问
三期临床研究结果已经发表,META分析还需要纳入二期的结果吗?
土井挞克树
如果是你写的可以纳入,不是你写的不建议纳入
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问
做病例对照研究的meta分析,可以只比较检验指标吗?
土井挞克树
OR值的说服力很高,没有OR值可能不容易令人信服
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问
关于Meta分析注册
土井挞克树
我认为你需要按照图片的要求修改。
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687 围观
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问
求助,在线等挺急的
土井挞克树
你的文章和数据的纳入标准重新修改一下
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问
求助frontiers in Cardiovascular Medicine已做好的图怎么按投稿要求修改
土井挞克树
可以使用ps图片修改,按照投稿要求。
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问
蛋白组学出现负数如何计算差异倍数
土井挞克树
负数的话可以取绝对值来计算差异倍数。
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682 围观
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问
super-CAT1-3×FLAG载体构建
土井挞克树
可以利用质粒进行连接,或者更换引物
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问
求助‖CD8+T细胞和肿瘤细胞共培养
Dr_劉医生
可以参考文献用的是ot1 和ova配对,T细胞发挥杀伤作用就是要TCR-MHC-I特异性识别 OT1和OVA,就是改造出来给他们配对的
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问
巨噬细胞极化诱导选用哪种?
Dr_劉医生
1. 小鼠的话选脾脏和甲状腺组织2. 用LPS诱导24h就够了,炎性表型很快出来的3. 具体看你测什么,一抗二抗孵育的话就免疫组化,取上清液测蛋白就用wb,其他炎症因子用elisa4. 贴壁都是小事,加胰蛋白酶消化就够了,
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796 围观
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问
HE、油红O、天狼猩红和免疫组化、免疫荧光的主动脉样本能不能统一冻存在-80℃冰箱中?
dxyc42u
可以统一放在-80度冰箱保存,但是需要包埋后再放
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问
RNA提取加氯仿几乎看不见白色薄层,但在透明液相里有白色物质贴壁
Dr_劉医生
加入氯仿后震荡不够剧烈导致无蛋白相,这种情况我也碰到过,将EP管重新充分剧烈震荡,然后再离心,可见中间的白色蛋白相。
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问
双酶切产物回收
Dr_劉医生
用切胶回收就行,然后用琼脂糖凝胶进行电泳,选择目的基因条带,T载体不是不要的,不用管。
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