实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

全部

细胞

问质粒提取浓度正常，但是比值总是超过2，是什么问题？

sswei

a260/a280大于2说明RNA没有除干净。需要对质粒纯化。

3 回答3354 围观

问用胰酶消化贴壁细胞，发现很难消化下来，该怎么办？

sswei

一、trypsin本身，胰酶没有在冰箱中放置。或者没有加入EDTA会影响其消化效果的。二、增加消化时间，提高trypsin 浓度。undefined,undefined的trypsin本身对细胞伤害不大。至少对cho细胞，暴露在undefinedtrypsin溶液中，近一个小时，细胞活性没有显著下降的。所以，可以提高trypsin浓度为undefined,或者消化时间延长些。三、小tricks，消化的时候，轻轻拍打方形瓶底部，或者在37摄氏度放置几分钟

4 回答2358 围观

问请问黑胶虫污染的问题如何解决呢？

loveliufudan

1. 确认污染：首先，通过使用合适的方法进行黑胶虫检测，如PCR、DNA染色、培养基检测等，确认细胞确实受到黑胶虫污染。 2. 隔离受污染细胞：将受污染的细胞与其他无污染的细胞分开，避免进一步传播。 3. 抗生素处理：使用适当的抗生素来清除黑胶虫污染。常用的抗生素包括环丙沙星、多西环素等，可以按照厂家建议的剂量和处理时间进行应用。在使用抗生素之前，可以通过培养基预处理、酸化或冻融处理等方法增强抗

4 回答2216 围观

问pH 4.5的乙酸怎么配制？

sswei

如果用冰醋酸与氢氧化钠配制。PH=PKa-lg[HAc]/[Ac-]4.5=4.75-lg[HAc]/[Ac-]lg[HAc]/[Ac-]=4.75-4.5=0.25[HAc]/[Ac-]=1.78/1需要冰醋酸的质量为0.1×1.78/2.78×60=3.8克需要氢氧化钠的质量为0.1×1/2.78×40=1.4克将两者与水配制成一升溶液即可。

3 回答1595 围观

问求助，BAF3悬浮细胞系进行质粒转染用啥转染试剂成功率高啊。

烧伤科常医生

我的经验是使用磷脂体转染试剂成功率能高一些

4 回答430 围观

问WB蛋白趋势对，但是条带大小大了15-20kda,不知道怎么回事

dxyc42u

有可能是mark的问题，换个别人的试试看

3 回答3033 围观

问细胞中发现黑胶虫污染怎么办？左氧氟沙星该怎么用？

烧伤科常医生

处理方法可以换优质胎牛血清，可以用伯胺奎、磺胺、四环素、贝尼尔、庆大霉素进行洗涤。不建议使用左氧氟沙星洗涤。

3 回答1978 围观

问测定体外细胞吞噬能力的方法有哪些？

loveliufudan

以下是其中一些常用的方法： 1. 吞噬试剂：利用特定的吞噬试剂，如荧光染料，将其与被吞噬的颗粒（如细菌、微珠等）结合。这些试剂在细胞内被降解后，会发出荧光信号，从而表明细胞吞噬了目标颗粒。可以通过荧光显微镜或流式细胞术来检测和计量吞噬事件。 2. 色素染色：使用特定的染料，如吡罗红、尼格罗蓝等，将细胞和目标颗粒一起染色。通过显微镜观察和计数染色的细胞和目标颗粒，可以评估细胞吞噬能力。 3. 放射性

4 回答2953 围观

问请问检测细胞凋亡时细胞能用胰酶消化吗？直接刮下来会有影响吗？

loveliufudan

在细胞凋亡检测中，保留细胞的完整性非常重要，以便准确测量细胞凋亡的标志物。直接使用胰酶消化细胞会导致细胞的形态和结构破坏，可能影响凋亡信号的检测。相反，常见的细胞凋亡检测方法包括使用特定的染料（如荧光染料）或抗体来标记凋亡标志物，如DNA断裂和磷脂外翻。这些方法通常在细胞处于附着状态下进行，而不需要胰酶解离。

7 回答1173 围观

问细胞里面有黑点点，状态好的时候不太明显，状态不好的时候很明显，是黑胶虫吗？

loveliufudan

黑胶虫可能是细胞中出现黑点的一个可能原因之一，但不能仅凭外观判断是否为黑胶虫污染。其他因素也可能导致细胞中出现黑点，如细胞碎片、凝固物或其他细胞内部的结构。为了确认是否为黑胶虫污染，需要进行相应的检测。

7 回答250 围观

问这是啥菌啊…已经扔了，只想知道咋整…

loveliufudan

很明显的霉菌污染，建议实行以下处理： 1. 隔离受污染的细胞：如果发现细胞培养物受到霉菌污染，首先应该将受污染的细胞培养物与其他无污染的培养物隔离开，以防止进一步传播。 2. 清除受污染的培养物：将受污染的培养物丢弃，避免与其他细胞接触。使用合适的消毒剂彻底清洁和消毒受污染的培养皿、培养槽和其他相关实验器具。 3. 消毒实验室设备和工作区域：彻底清洁和消毒受污染的实验室设备、工作台、试剂瓶等，以防

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问用特定L929上清培养和细胞因子刺激得到的BMDM有区别吗？

loveliufudan

两种方法获得的BMDM在一些特性上可能存在一些差异。特定L929上清培养获得的BMDM通常被认为具有较高的基础巨噬细胞活性，如吞噬能力和细胞因子产生能力。而经过细胞因子刺激的BMDM则可以根据所添加的因子类型和浓度来调控细胞的分化程度和功能特性。因此，选择使用哪种方法获得BMDM应根据具体的研究目的和需求。特定L929上清培养方法适用于简单和快速获取功能活性较高的BMDM，而细胞因子刺激方法则可以

3 回答1657 围观

问①细胞培养过程如何检测细胞老化？ ②细胞发生支原体污染时有无好的办法挽救？ ③3D细胞培养的优缺点。

loveliufudan

① 检测细胞老化的方法有多种。以下是几种常见的方法： • 检测酶活性：测定细胞中特定酶的活性，如β-galactosidase活性，是一种常用的细胞老化指标。老化细胞通常会表现出增强的β-galactosidase活性。 • 检测端粒长度：通过测量端粒长度来评估细胞的老化程度。细胞老化会导致端粒缩短。 • 检测染色体异常：老化细胞通常会出现染色体异常，如染色体断裂、融合或缺失等。 • 检测细胞周期

5 回答180 围观

问细胞培养基调节pH值，到底是以空气中的为准，还是以5%二氧化碳中平衡后为准？

loveliufudan

在细胞培养中，维持适当的pH值对于细胞生长和功能至关重要。通常情况下，细胞培养基的pH值应以平衡了5%二氧化碳（CO2）的环境为准。细胞培养基中的CO2与空气中的CO2浓度不同。空气中的CO2浓度约为0.04%，而细胞培养基通常在培养箱中通过添加5% CO2来维持适当的pH值。这是因为CO2在水中会形成碳酸，可以通过平衡CO2浓度来调节培养基的pH值。细胞培养箱会提供一个稳定的环境，其中包含5%

4 回答1089 围观

问想问一下细胞培养所用的培养液有哪些，各有什么区别呢？

loveliufudan

细胞培养中使用的培养液种类很多，每种培养液都有其特定的配方和用途。以下是几种常见的细胞培养液及其主要特点和应用： 1. DMEM（Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium）：DMEM是一种基础的培养液，含有丰富的营养物质，如氨基酸、糖类和维生素等。它适用于多种细胞类型的培养，包括肺、肾、肝和成纤维细胞等。 2. RPMI-1640：RPMI-1640是一种专门用于淋巴细

4 回答1358 围观

问求助🆘测定某种细菌对动物的半数致死量，应该怎么分组，怎么设置浓度梯度，每组的实验动物最少得多少只？

dxyc42u

分组就设置为正常对照和感染组，浓度可以参考文献中的，每组有四五只动物就行

4 回答903 围观

问细胞培养过程中的小黑点

烧伤科常医生

有可能是黑胶虫，细胞碎片，凋亡小体，血清中的沉淀或者是支原体的污染。

9 回答453 围观

问请问这个是什么菌？咋根治？

Keven轩

看着像真菌，扔掉细胞并且彻底清洁细胞间

6 回答359 围观

问细胞培养浓度太低，求助？

Keven轩

可以换口径更小的培养皿，并且减少培养基的使用体积

4 回答190 围观

问AM/PI活死细胞染色红绿荧光重叠问题

哼哼哈哈Yolk

请问你解决了吗，我也遇到了同样的问题，红绿荧光重叠在同一个细胞内

6 回答10284 围观

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