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        重组腺病毒质粒,转化到重组酶缺失X10-GOLD感受态中,不长单菌落。为什么

        相关实验:腺病毒载体实验

        user-title

        阿诺BP95


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        3 个回答

        user-title

        晓雨知春来

        有帮助

        有可能是未重组的质粒无法在感受态中复制.也就不会表达抗性标记基因。

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        分析起来,重组腺病毒质粒转化到重组酶缺失 DH10B 感受态中不能长单菌落的原因可能有:


        1. 重组酶的缺失导致感受态细胞失去了同源重组的能力。


        2. 重组腺病毒质粒中含有腺病毒序列,不能在大肠杆菌中复制。


        3. 没有重组酶,质粒无法与感受态的基因组DNA进行同源重组。


        4. 未重组的质粒无法在感受态中复制,也就不会表达抗性标记基因。


        5. 因此转化子无法在选择培养基上生长形成单菌落。


        6. 重组酶是进行同源重组的关键酶,它的缺失导致外源质粒无法整合到主体染色体上,无法在感受态中传递扩增。


        所以综合来说,重组酶的缺失导致重组腺病毒质粒转化后无法进行同源重组,也就不能在大肠杆菌中传承,从而不能在选择培养基上生长形成单菌落。

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        首先可能是重组质粒纯化不足,所以不长单菌落,还有可能是感受态转化不足所以不长单菌落

        user-title

        阿诺BP95user-title

        请问可能是质粒浓度不够么,想10微升质粒转化50微升感受态可以吗,谢谢

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