晓雨知春来
有可能是未重组的质粒无法在感受态中复制.也就不会表达抗性标记基因。
loveliufudan
分析起来,重组腺病毒质粒转化到重组酶缺失 DH10B 感受态中不能长单菌落的原因可能有:
1. 重组酶的缺失导致感受态细胞失去了同源重组的能力。
2. 重组腺病毒质粒中含有腺病毒序列,不能在大肠杆菌中复制。
3. 没有重组酶,质粒无法与感受态的基因组DNA进行同源重组。
4. 未重组的质粒无法在感受态中复制,也就不会表达抗性标记基因。
5. 因此转化子无法在选择培养基上生长形成单菌落。
6. 重组酶是进行同源重组的关键酶,它的缺失导致外源质粒无法整合到主体染色体上,无法在感受态中传递扩增。
所以综合来说,重组酶的缺失导致重组腺病毒质粒转化后无法进行同源重组,也就不能在大肠杆菌中传承,从而不能在选择培养基上生长形成单菌落。
土井挞克树
首先可能是重组质粒纯化不足,所以不长单菌落,还有可能是感受态转化不足所以不长单菌落
阿诺BP95
请问可能是质粒浓度不够么,想10微升质粒转化50微升感受态可以吗,谢谢
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