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高尔基染色过程中出现切片脱落主要与操作技术及溶液处理有关,常见原因包括:
切片干燥不足
D液(甘油+蔗糖混合液)沉糖时间不足可能导致切片黏附力下降,需确保完全浸没并静置3天以上。
缓冲液冲洗过猛
E液(浓氨水)冲洗时水流过强会破坏组织结构,建议缓慢冲洗或使用蒸馏水替代以减少冲击。
修复液使用不当
若采用抗原修复步骤(如高压或加热),操作过猛或时间过长会导致组织结构松散,建议控制高压时间并采用温和加热方式。
修复剂选择不当
使用EDTA修复液比柠檬酸更易引发脱片,优先选择柠檬酸以维持组织稳定性。
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