外周血中嗜酸性粒细胞的分离

外周血中嗜酸性粒细胞的分离可以采用磁性细胞分选技术的阴性选择法。以下是具体的步骤：

首先，使用3%明胶溶液沉降红细胞，上层液用梯度离心去掉单个核细胞，用低张溶液除去红细胞。

接着，通过尼龙毛柱粘附去除中性粒细胞。由于嗜酸性粒细胞与尼龙毛柱的粘附力较弱，因此可以在此过程中被去除。

然后，将剩余的细胞与鼠抗人CD16单克隆抗体标记的免疫磁性微球（Immunomagnetic Microbeads，IMB）共同孵育。由于CD16存在于中性粒细胞表面，而不存在于嗜酸性粒细胞表面，因此免疫磁性微球将与中性粒细胞结合，而不结合嗜酸性粒细胞。

通过自制的磁性细胞分选仪（Magnetic Activated Cell Sorter，MACS），中性粒细胞将被滞留于磁场中，而嗜酸性粒细胞则可以自由通过磁场。

最后，收集通过磁场的细胞，即可得到分离的嗜酸性粒细胞。可以检测其纯度、存活率，并计算其回收率。

请注意，由于人外周血嗜酸性粒细胞寿命短，收集困难，因此分离过程需要谨慎操作，以确保细胞的完整性和活性。此外，具体的分离方法可能因实验室条件和设备而有所不同，因此在实际操作中需要根据具体情况进行调整。