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        求助!原代神经元OGD条件

        相关实验:多极神经元心态学观察实验

        user-title

        凝望太阳的向阳花

        最近在做神经元OGD,效果特别不理想,OGD半小时,复氧12小时的时候细胞就都死差不多了。OGD用的DMEM无糖培养基,94%N2,5%CO2,1%O2(无氧箱最低只能调到1%),复氧用的neurobasal+B27+谷氨酰胺+双抗。求问各位前辈,如何做神经元OGD?

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        3 个回答

        user-title

        dxyc42u

        有帮助

        你这条件没问题,细胞状态怎么样啊,状态不好的细胞做这个实验效果就是不理想

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        进行神经元OGD (氧-葡萄糖剥夺) 实验时,有几个关键因素需要注意,以优化实验效果:

        1. 剥夺时间和复氧时间:根据文献或先前的实验经验,确定最适合你的实验的剥夺时间和复氧时间。对于不同类型的神经元,最佳的剥夺和复氧时间可能会有所差异。

        2. 细胞培养基和缓冲液:使用适合的培养基和缓冲液来模拟缺氧和复氧条件。确保培养基中不含葡萄糖,并在缺氧条件下使用缺氧气体混合物(通常是94% N2,5% CO2,1% O2)。复氧时使用含有足够营养物质的培养基。

        3. 温度和湿度控制:在实验过程中保持适当的温度和湿度,以模拟体内条件。确保无氧箱的温度和湿度稳定,并根据细胞类型和要求进行设置。

        4. 细胞密度和培养条件:根据细胞类型和实验需求,确定适当的细胞密度和培养条件。确保细胞密度适中,细胞能够均匀生长并保持适当的营养供应。

        5. 控制实验组:除了OGD组,还应包括适当的对照组,如正常培养条件下的细胞或模拟缺氧条件但未进行氧-葡萄糖剥夺的细胞。这有助于比较和评估OGD实验的效果。

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        如果无氧只能调到1%,建议延长无氧剥夺的时间

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