有没有老师成功做过成骨细胞和破骨细胞共培养实验想请教具体做法，我最近再用小室共培养mc3t3细胞和raw264.7，失败了。

没有做过，不过在我印象中成骨细胞和破骨细胞作用正好相反，你共培养应该很容易失败吧。不知道你实验目的是什么？

可以借鉴一下这篇文章《小鼠成骨细胞和破骨细胞共培养模型的建立》。

可以用transwell做成骨细胞破骨细胞小室共培养

以下关键因素，都可能影响MC3T3和RAW264.7细胞共培养的成功率：

1. 培养条件：MC3T3和RAW264.7细胞类型的培养条件可能会有所不同。对温度、CO2浓度和培养基的选择都应特别注意。

2. 间隔时间：由于MC3T3细胞在体外生长和分化的速度可能较慢，因此在加入RAW264.7细胞之前，可能需要预先培养MC3T3细胞一段时间。

3. 细胞密度：确保在实验开始时细胞的接种密度是合适的。过低或过高的细胞密度都可能影响实验结果。

4. 诱导剂：您可能需要添加如RANKL等诱导剂，以促进RAW264.7细胞向破骨细胞方向分化。

5. 小室的设计：确保小室内的环境适合细胞生长，并且两种细胞可以有效交流。