不太聪明的馒头
最近在做大鼠皮肤石蜡切片,但切出来的片子组织都是碎的(4um厚),摊片的时候组织也会碎,想知道是什么原因?考虑可能是脱水透明时间的问题,网上查找的方法时间迥异,求助各位有没有懂的,下面是我查文献查到的,那个方法比较好?或者能不能有大神给一份实验步骤,十分感谢!
huarenqiang5
考虑原因主要是:1.可能脱水处理不当,重新脱水处理。2.有透明剂残留,需增加浸蜡时间,重新包埋。3.由于脱水剂和透明剂的影响,使组织变硬发脆,需调整脱水程序。4.可能组织太大,建议分开包埋。
建议切片之前放-20度冰箱把组织块放20min会比较好切。
土井挞克树
可能是脱水的时间太长了,减少脱水时间。
loveliufudan
出现大鼠皮肤石蜡切片组织碎裂的问题,可能与多个因素有关,包括样本处理和石蜡包埋过程。下面列出一些可能导致组织碎裂的因素和对应的解决方法:
组织处理不当:在制备切片之前,组织可能需要经过固定、脱水、透明、浸蜡等处理步骤。如果处理不当,比如固定时间太短或者脱水透明过度,都可能导致组织碎裂。因此,可以考虑优化组织处理方案,比如延长固定时间或减少脱水透明时间。
切片机切刀不良或者不锋利:如果切片机的切刀不良或者不锋利,也会导致组织碎裂。因此,可以考虑更换刀片或者调整切片机的切刀。
切片过程中的力度过大:在切片的过程中,如果施加的力度过大,也容易导致组织碎裂。因此,在切片的过程中应该控制力度,尽量避免过度施力。
切片后的处理不当:在切片后,可能需要对切片进行染色、脱蜡等处理。如果处理不当,比如染色时间过长或者脱蜡温度过高,也可能导致组织碎裂。因此,可以考虑优化切片后的处理方案,比如缩短染色时间或者降低脱蜡温度。
关于如何优化切片过程,可以参考以下步骤:
固定组织:选择适当的固定剂和时间,确保组织固定完整。
脱水透明:根据组织类型和大小,选择适当的脱水透明方案,比如逐步脱水透明或者直接脱水透明。
浸蜡:将脱水透明后的组织浸入熔蜡中,确保组织充分浸润。
切片:使用锋利的切刀,控制好力度,制备4um厚度的切片。
处理切片:选择适当的染色和脱蜡方案,确保切片质量。
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