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        求助THP-1细胞相关问题

        相关实验:单层细胞在细胞瓶中的接种

        user-title

        芒果遇上梨

        因为THP1细胞需要使用PMA才能诱导成巨噬细胞

        1,如果对THP1细胞进行转染,是否是在使用PMA将THP1细胞诱导成巨噬细胞后,再进行转染?

        2、如果使用病毒感染,构建稳定细胞系又该如何操作呢?也是在PMA诱导后,再进行病毒感染,然后筛选?最后收集冻存的稳定细胞系,复苏后还需要再加入PMA诱导成巨噬细胞吗?

        3,THP1细胞长到哪种状态时可使用PMA进行诱导,PMA浓度?诱导时间?

        4,经PMA诱导的THP1细胞,是否不在不加入PMA的情况下也一直保持贴壁,传代后也不需要再加PMA?

        5,贴壁的细胞能直接用于传代培养吗?如果可以,不继续加入PMA,此时还能贴壁吗?

        问题有点多,麻烦大家了

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        3 个回答

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        贴壁的细胞可以直接用于传代培养,不需要继续加入PMA。

        user-title

        huarenqiang5

        有帮助

        经PMA诱导的THP1细胞,不加入 PMA时也可以保持贴壁,传代后也可以不加PMA。

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        1、如果对THP1细胞进行转染,需要先使用PMA诱导成巨噬细胞,再进行转染,这样可以使得转染的效率更高。

        2、如果使用病毒感染,则需要在PMA诱导后再进行病毒感染,筛选后稳定细胞系,最后再冻存。如果在复苏后要求细胞处于巨噬细胞状态,则需要再加入PMA进行诱导。

        3、关于PMA诱导THP1细胞的浓度和时间,需要根据实验具体要求进行调整,通常使用10-100ng/ml的PMA,诱导时间为48-72h。

        4、诱导后的THP1细胞一般不再需要加入PMA,但是需要进行实验验证。

        5、贴壁的细胞一般可以直接用于传代培养,如果不加入PMA,细胞是否仍然能够贴壁,也需要根据实验结果来决定。

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