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        求助|细胞加药时机

        相关实验:单层细胞在细胞瓶中的接种

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        蜡笔小迟

        我想请教下各位大虾:如果我加药后看24h以内的作用,细胞长不起来,是不是应该加药的时候细胞长得满一点,70%-80%可以吗?如果看时间长一点的作用,细胞能长的很满,是不是应该加药的时候细胞长得比较少?50%-60%?如果我看加药后2h到72h的作用,是不是应该根据时间掌握不同的加药时机?(24h内70-80%,24h后50-60%?)这样加药时机不同会不会导致对药的反应不一致?多谢各位指导!

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        3 个回答

        user-title

        balalaLy

        有帮助

        可能是你的药物浓度太高了,细胞少的时候就长不起来。一般是加药的时候在50-60%的汇合度,观察24-72h的情况。

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        首次加药细胞密度高一点最好在80%左右

        user-title

        huarenqiang5

        有帮助

        每个细胞都不一样,一般是细胞长到80%的时候可以铺板

        你可以先做个生长曲线,确定最佳的铺板密度和生长时间,比如PC12就加药6小时就行,而Sao-2需要48小时,一般你可以试试培养12小时

        你是一次性把细胞接种到6孔板或12孔板中吧

        做药物时间实验, 一般采取"倒叙法". 假设要检测0到72小时药物处理的细胞, 每24小时为一个点. 操作:

        1. 以一定密度种细胞各个时间的和重复的细胞一起种上,带细胞贴壁后。

        2.加药用培养基(溶解药的培养基)

        第一天(72小时点): 加药用培养培养基与处理72小时, 设3个以上平行孔.(六孔板的话可以同时做三个)

        第二天(48小时点): 同上操作

        第三天(24 小时点): 同上操作

        第四天(0 小时点): 同上操作。其实这个就到了处理时间了。

        注意的问题:

        1.细胞密度问题,三天之内基本长到板底90---98%,所以你的知道细胞增长速度。

        2.加药后,药用培养基的最终浓度。

        3.种细胞的时候培养液最好是终体积的一半,这样就可以加一半2倍浓度的药用培养液了。个人建议终体积2----2.5ml。

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