细胞免疫荧光求助

1.你这个感觉是细胞太多了，不在一个层面所以dapi拍的模糊。2，细胞透不透化，要看你的实验目的，如果是膜蛋白不用，如果是细胞内的蛋白，则必须透化。3，你看看你的盖玻片干净不，还有就是盖玻片周围有封胶么？胶封的太厚，可能会卡在在物台上，从而导致层面不一。

做免疫荧光一定要通透，不然会染不匀

请问一下大家，拍出来的荧光看着特别脏是为什么呀？而且核DAPI染色感觉深浅不一？还想问一下就是买的商品化的固定液和封闭液，没有通透，这是不是造成荧光拍出来暗呀？

染色其实是没有问题的，dapi深浅不一是因为你的细胞特别多，然后焦距不能全不对焦到同一层面，绿色也是这个原因。固定液和封闭液都可以买商品化的，如果是做膜蛋白可以不通透，胞浆蛋白核蛋白需要通透。