肿瘤干细胞培养困惑，求高手解答

showme5267

2022-08-18

我做的是甲状腺未分化癌干细胞的培养，用的细胞系（8505C,CAL62），用的是无血清培养法，DMEM/F12+B27+EGF+bFGF。最近培养发现一个比较难受的问题，刚开始培养悬浮细胞很多，经过2-3次传代或换液，细胞大面积贴壁，用胰酶消化后重新悬浮，仍有大量细胞贴壁，我每次已经多次用PBS洗细胞，换过好几种无TC处理的培养瓶，但还是出现这种情况，很困惑，请高手帮忙解答，谢谢

3 个回答

麻黄连翘赤小豆

2022-08-19

有帮助

建议不要太过频繁的传代和清洗，本身胰酶对细胞是有损伤的，贴壁细胞没用了，已经老化，把剩下的悬浮细胞好好培养

showme5267

2022-08-26

我现在很少用酶消化了，直接离心后换液，但是还是贴壁啊

Eason老歌迷

2022-08-18

有帮助

其实你这里认识有点误区，就是悬浮细胞一定不会贴壁，事实上没有完全不贴壁的细胞，据我所知，细胞贴壁依赖的是细胞表面的桥粒结构，这种结构其实各种类型的细胞上都有，只是实质组织来源的细胞更加密集而已，而其他本来就是单独存在的细胞比如淋巴细胞上这种结构很少而已。但是少并不意味着就不能贴壁。我养巨噬细胞的时候也是，一半贴壁一般悬浮，而且贴壁的细胞相当牢固，必须用胰酶消化才行。