原代成纤维细胞传代后 飘了好多 黑色团块 培养基清澈 但仔细看有流沙样

感觉还是传代时消化过头，以至于细胞老化（胞浆出现明显黑色颗粒是细胞老化的标志），现在我采取的消化传代方法是：1，先用PBS细两遍，以去除残余血清对胰酶消化的影响2，加适量胰酶（以能铺满瓶底为宜），镜下观察见饱体回缩时即倒去胰酶3， 利用剩下的一点点胰酶再消化，此时可以放入37度温箱中4，隔半分钟到一分钟将细胞拿出，侧拍瓶壁（用力），镜下可见细胞基本都已掉下来，此时可以加含血清培养基中和，再用吸管吹瓶壁，这样能再吹下来一些细胞

有可能是细胞纯度不高，建议重新提取细胞试试

这个可以考虑是传代过程中污染了。