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我的细胞铺96孔板的时候总是出现这样的问题,细胞加药或者换液后突然全部死亡,都裂解掉了,换液前贴壁贴的挺好的,试过别的细胞系,换过孔板,也有出现这种状况,这是为什么呢?
未来9
检查一下药品配置过程,是不是药物浓度太高了啊?或者溶剂、PH等有问题?
Keven轩
可能是你加胰酶的量过多或者浓度过大,细胞消化过度,而且吹打混匀过多导致细胞裂解。而且下次加药的时候可以从培养皿边缘加药,且不要用力将液体大下
Eason老歌迷
可能有几个原因,1.换液的时候,离酒精灯太近,细胞干死了,2.消化的时间过长,细胞损伤,3.和血清浓度太低了有没有关系,4.培养基从冰箱里拿出来没有预热,对细胞刺激太大。
天一湖医者
1、透气必须透干净彻底,一般需要在培养箱内风扇开的情况下,无菌室的通风也开的情况下,开门透气30min,期间,可以保持紫外灯打开状态,减少空气中细菌感染。而且透气前,该无菌室最好紫外照射过夜。2、另一个容易被忽略的问题就是,在透气完之前,不要在培养箱的水盘里加入加湿用的水。因为,这个时候培养箱中的酒精浓度还比较高,它会溶到水里面去,就不容易一下子释放出来。而随着你的培养,温度升高到37℃,水在蒸发的过程中也会把酒精带到培养箱空气中,这样就会影响细胞的状态了,严重也会导致细胞死亡。