实验问答22,831,004 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

问胶原酶分种属区别吗

sswei

胶原酶分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ型以及肝细胞专用胶原酶，要根据所要分离消化的组织类型选择胶原酶类型。并不分种属区別。胶原酶Ⅰ用于上皮、肺，脂肪和肾上腺组织细胞的分离。用于消化组织中连接部分使其成为单个细胞，用于哺乳动细胞的分离。

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问切片子出现的问题

sswei

存在切片物料硬度太高；切片物料的粘汁将刀刃粘住；用力不均匀等情况。

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问有老师同学给大鼠尾动脉置管吗？求分享经验

dxyc42u

使用最细那种针穿刺比较好弄一些

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问小鼠B淋巴瘤模型

章鱼丸子呀

请问您构建的是外周还是中枢呀？现在构建成功了吗？谢谢！

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问【免疫荧光二抗选择问题】

loveliufudan

在进行小鼠组织石蜡切片三色免疫荧光染色时，需要考虑到不同抗体之间的交叉反应问题。以下是一些建议：在选择抗体时，最好选择不同种属的抗体，以减少交叉反应的可能性。例如，您可以选择兔抗小鼠、鼠抗兔、羊抗小鼠等抗体。在进行染色之前，需要进行抗原修复和非特异性结合位点的阻断，以提高染色效果和减少背景信号。您提到的封闭液有山羊血清和BSA，可以根据您所使用的抗体和实验条件进行选择。在选择二抗时，最好选择与一抗

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问求助b细胞培养

sswei

培养条件应该是在pma(5ng/ml)加5％t细胞上清液存在下用辐射的el4b5。

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问transwell细胞侵袭

z流沙z

常用冰的4%多聚甲醛，pbs洗的时候轻柔一点

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问GelMA水凝胶细胞共培养的问题

晴空a

如果培养基含有大量细胞代谢产物，像乳酸和二氧化碳物质会使得培养基变黄。还有就是抗生素、生长因子等化合物被氧化或者分解也会使培养基变黄。

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问小鼠原代心肌细胞提取

土井挞克树

新生大鼠心肌细胞对酶消化极为敏感.消化过度可使肌原纤维出现萎缩，细胞死亡率增加或丧失贴壁能力及搏动能力，你这是消化过度

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问原代细胞多次传代后碱性磷酸酶怎么变化啊

loveliufudan

一般情况下，原代细胞经过多次传代后，其碱性磷酸酶（alkaline phosphatase）活性会逐渐降低。这是因为细胞在不断分裂和增殖的过程中，会逐渐失去其原始状态，包括其特定的表型和功能。此外，不同类型的细胞在多次传代后对碱性磷酸酶的变化也可能不同。有些细胞类型在多次传代后仍然保持较高的碱性磷酸酶活性，而其他细胞类型可能会完全失去这种酶活性。需要注意的是，细胞的传代次数和其碱性磷酸酶活性之间并

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问为什么293T细胞一传代就死了？

z流沙z

293t生长比较快，传代比例应该不止1：2，另外要注意不要吹打太多

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问请问stdev范围多少正常，误差棒太短看不见的图片能用来发sci吗？

loveliufudan

对于数据的标准差，其正常范围取决于实验设计和具体研究领域。在一些实验中，标准差可以很小，例如在高度控制的实验中，标准差可能只有几个百分点。而在其他类型的实验中，标准差可能会很大，甚至可以超过均值的一半以上。在科学研究中，误差棒（error bars）是用于表示数据集合的变化范围和不确定性的重要工具。误差棒的长度取决于标准差的大小，标准差越大，误差棒就越长。如果误差棒太短，可能会掩盖数据变化的重要信

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问Thp1细胞培养的要点

sswei

THP-1细胞培养于含有10%FBS+1%P/S的RPMI-1640培养基中，培养环境为37℃，5%CO2。可以每隔3-4天加一些新鲜的培养基，或直接传代。细胞传代：当细胞密度达到约8x10^5cells/ml左右时，即可进行传代。由于是悬浮细胞，可直接将细胞吸出，离心之后传代。传代最少浓度不应少于1x10^5 cells/ml。注意事项细胞养不好，可能的原因有，THP-1细胞特别依赖细胞浓度，A

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问hela细胞传代一次后不到二十四小时就长满了，请问可以立即传代嘛

秋秋欣欣

可以，下次注意可以多传几瓶，每次这样还是不太好

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问磁珠分选可以选什么细胞？？毕业论文无头绪，请大佬们指点

土井挞克树

细胞都可以，只要是有免疫作用位点，可以孵化抗体就可以

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问PBS出现沉淀，还能用吗？

dxy_mqg1dtg8

如果PBS出现沉淀，可以尝试通过轻轻摇晃或逆流混匀来重新悬浮沉淀，如果能够悬浮则可以继续使用。如果PBS沉淀过多或者无法悬浮，则需要重新制备新的PBS缓冲液。

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问求助大佬们呀

sswei

细胞密度过大，细胞间相互挤压变形。细胞培养用的试剂PH不适合细胞生长，例如偏酸或者偏碱等情况。

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问成骨细胞茜素红染色

loveliufudan

可能原因有以下几点：茜素红染色液的浓度太高或者染色时间太长，导致非钙盐沉积的部位也被染色，影响染色效果和准确性。固定液的浓度或者固定时间不足，导致细胞膜不完整，细胞内钙离子外溢，形成非特异性的钙盐沉积。PBS洗涤液的pH值不合适，导致茜素红与钙离子的复合物不稳定，部分溶解或析出。染色后未及时观察或保存不当，导致染色效果变差或出现污染。为了避免这些问题，你可以参考以下几点建议：根据样品的钙离子含量和

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问细胞提蛋白没有细胞刮用胰酶行不行

sswei

T25培养瓶加200-400ul裂解液，一般加200ul合适。

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问原代兔软骨细胞怎么取

sswei

可以选用1d龄新西兰兔膝关节软骨获取大量软骨细胞，存活率高。

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