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问
复苏后第二代死亡是为什么?
yyygo
CHO细胞,做稳定转染,为何不加MTX筛选呢?这样不能保证细胞是单克隆啊,如果是细胞瞬时转染表达的话,瞬时快速不需压力筛选
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问
为什么会出现自发性荧光?
loyh
所有细胞都会有不同强度的自发荧光,自发性荧光与细胞内的NADH、核黄素等成分所引起的,这些成分可以被蓝光所激发,发射光波谱大约500-700nm范围,与几种常用的荧光染料,如FITC/PE等的发射波谱有一定的交叉!它的波峰为绿光,因此与FITC发射波谱重叠最多。
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问
细胞冻存后复苏后的最佳接种浓度?
fyydnz
好久没做实验了,但把我依稀记得的细胞冻存复苏的心得说一下吧! 个人觉得没有统一的规定说一管冻存的细胞可以复苏几瓶。首先得看你当时冻存细胞的状态,数量等,要是“种子”不行的话,你后面再怎么复苏,细胞状态也不会好的!再者当复苏后,当离心去除冻存液之后,用培养基吹打开细胞后,可以用肉眼观察下大概细胞浓度,如果觉得细胞浓度很高,可以适当多接种几瓶,要是浓度很低的话,那就少接种,有个一瓶就够了。第三,接种后
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问
为什么要使用无血清培养基?
JMZ贝雷帽
避免细胞本身的增值对实验造成的影响
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问
细胞凋亡检测试剂怎么选择呢?
我是金博士
细胞凋亡检测试剂已经是常规试剂了,选择没那么复杂。国产的多是买的国外的自己进行分装,实验试剂这东西,经费少的话可以试试国产,经费足或者对结果要求高建议还是就直接用国外的好。如果你仅仅是一般地细胞凋亡,可以用Annexin V-FITC&PI,这个凯基公司有的,我用过。好像是20T,5-600RMB。如果你还涉及到了细胞内本身表达报告基因,诸如(E)GFP之类的,你可以买BD公司的Annex
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问
神经元不长是什么原因?
天颜
1.消化时间长了!跟加什么关系不大。2.PLL铺板没?没有必死无疑!
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问
冻存细胞从 -80 转到液氮的运输有没有好的方法?
xxfn
没有,哪有这样,不会是这个影响,细胞培养中的其他问题吧应该是
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问
umr-106 细胞培养结果完全不能用,到底是为什么呀?
wangyy1990
是的,“如果血清里里不含你药物的成分,且不和你药物相互作用,是可以加血清的。”。我们一般也是1%的血清,后期不加血清。
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问
原代大鼠神经元培养为什么会染菌?
yyygo
黑胶虫不会使培养基产生明显变化,而且对细胞的生长也不会有大影响,一般细胞生长好的话,黑胶虫会自动被抑制,菌液变浑浊变白是染其他菌了,而且是原代培养,染菌的主要事项要注意很多了 ,可以看一下网上很多文章吧
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问
半贴壁细胞做免疫荧光,该怎么处理呢?
jingle8713
收集细胞,用PBS洗涤,然后加入血清重悬。载玻片要用酒精泡,然后清水浸泡,烤干之后用多聚赖氨酸浸泡,烤干后,将细胞悬液涂在载玻片上面。室温晾干,待片子干了之后就可以继续往下走了,固定,通透等
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问
硫酸镍加入 PBS 后一直不溶解是为什么呢?
脂肪鱼
跟酸碱度有关
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问
神经瘤细胞能直接放液氮罐冻存吗?
angell_202
神经瘤细胞不能冻液氮罐吗?为什么?如果是-80度直接放液氮罐,如果现准备冻存,按冻存步骤来。
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问
细胞密度对细胞周期有影响吗?
菜问喵
而且尤其是凋亡检测,如果细胞太满影响会很大
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问
贝类的血细胞能否直接用试剂盒?
苏格兰白草莓
申请个试用装试试就知道了,反正实验材料还是很好获得的吧
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1745 围观
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问
为什么要铺两层浓度不同的琼脂呢?
塞舌尔墨宝
底层浓度高提供营养同时防止细胞贴壁,上层浓度低有稀疏的孔径也可提供营养使肿瘤细胞形成细胞球,同时可加入其他药物或细胞因子设置不同对照,
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问
细胞传代消化时间过长,消化不下来,这样会对细胞有损害吗?
zyj0630
消化时间过长对细胞的呼吸酶和膜蛋白有损害作用,可以通过拍打细胞培养瓶的物理手段来缩短消化时间。但是个人认为你描述的情况,即本来这种细胞消化时间没那么长,培养时间过长再传代时消化时间变长,这个细胞的有些性质可能已经发生变化了……后续实验中使用不是很好。
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问
我用多聚赖氨酸包被了,还是脱片很严重,请问有好的解决方法吗?
丁小燕
只有在用PBS洗涤时要轻柔,每一步都要轻柔才行!
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问
POD做细胞凋亡,DAB显色后,需要用苏木素复染阴性细胞核吗?
wendyk
用苏木精复染一下结果会更加清晰,但要注意复染的时间不要过长,能够看清楚细胞核的轮廓即可,染的过深可能会覆盖你的阳性信号。至于DAB你直接买显色试剂盒即可,中山和博士德都有,直接买来用就可以了。自己配的染色效果可能还不好。
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问
鼻咽癌 CNE2 细胞培养过程中形态为啥会变(梭型变成多边形)?
dengchch
其实CNE2也不是完全是梭形吧。有的是梭形,有的多边形,尤其是像CNE2这种细胞。我们研究部有挑过CNE2细胞的单克隆,发现一些克隆是主要呈梭形,一些则呈现多边形或不规则形状,梭形的细胞一般恶性较强。所以CNE2可以认为是一个混杂了多种类型细胞的细胞系,这其实也符合癌症细胞异质性的理论。我觉得只要细胞状态正常,性状与之前基本一致,确定没有其它细胞污染,就可以用来做实验。
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问
冻存的细胞可以先在-80°冰箱放几天再移入液氮吗?
我是金博士
理论上市不太有影响的,最好还是按要求哦
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