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问
抽提的质粒DNA电泳时怎么出现基因组DNA的污染?
bamboopiggy
加buffer2 裂解大肠杆菌的时候,操作轻柔,一定按照kit的说明书给的时间,及时加入buffer3,终止裂解。否则就会出现genomic DNA的污染。
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问
为什么提出的质粒的多是二聚体和多聚体形式?
一个小哭包
这个与宿主细菌的种类有关系,网上可以查到。与电泳也有关系
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问
加样时DNA飘出加样孔外?
bamboopiggy
你将DNA和loading buffer混合以后再往胶孔里面加啊,注意loadingbuffer的浓度。
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问
B16细胞离心之后的细胞颜色
bamboopiggy
B16就是黑色素细胞瘤,在细胞多了以后,培养的上清都会变成黑色的,是细胞产生的黑色素增多所致,没问题。
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问
细菌的透射电镜染色该怎么做呢?
bamboopiggy
染色之前,当然要固定,最好这个你找专门做切片的技术员帮你弄。
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问
原代细胞过表达某基因能做稳转嘛
bamboopiggy
能活15代的话,做稳转没问题,稳转,一般筛2周差不多就筛出来了。
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问
请教这个文献中唇颈环HE染色结果怎么看,是通过什么看出上皮组织组织损伤的呢?
bamboopiggy
因为好奇,我直接调出来原文看了一下: Black dashed lines with arrowheads outline the region of tissue damage in (P) and (Q) upon Srsf1 (P) and Srsf3 (Q) deletion, respectively. Dashed lines outline laCL---带箭头的黑色虚线分别勾勒出
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问
请问用胰岛素体外刺激细胞之前都需要饥饿处理吗,为什么呢?感谢解惑
未来9
要的血清饥饿法培养主要有以下用途:(1)使细胞周期同步化。 该方法可将细胞周期阻滞在G0/G1期,在此基础上进行的后继处理及细胞周期变化分析,结果更有说服力。这也是细胞饥饿法最主要和最常见的用途。在进行异种体细胞核移植重组胚胎前也要用该法使细胞处于休止的G0期。(2)无血清培养可使细胞处于饥饿状态,在加入药物后可更好的吸收药物,有助于药物作用的发挥。(3)血清可激活与细胞生长有关的信号通路(如MA
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问
4T1细胞培养的观察
bamboopiggy
一般肿瘤细胞还是比较tough,比较好养的。你如果不确定形态,可以去atcc官网上看一下,或者维基百科也可以
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问
细胞传代培养液中黑点问题?
dxy_gwrp7ndq
很可能是污染,如果污染的细胞数量不是很多,建议直接丢弃,或者重新复苏细胞进行培养。
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问
MTT与CCK-8比较?
未来9
CCK-8法的优点:1、使用方便,省去了洗涤细胞,不需要放射性同位素和有机溶剂;2、CCK-8法能快速检测;3、CCK-8法的检测灵敏度很高,甚至可以测定较低细胞密度;4、CCK-8法的重复性优于MTT法;5、CCK-8法对细胞毒性小;6、CCK-8细胞活性检测试剂中为1瓶溶液,毋需预制,即开即用。CCK-8法的缺点:1、与MTT法相比,CCK-8和XTT的价格比较贵。2、CCK-8试剂的颜色为淡
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问
传代培养细胞死亡的问题?
dxy_gwrp7ndq
刚复苏的细胞一开始长得很好一传代就死,可能有以下四种原因:1,培养液有毒。2,PH有异常。3,细胞对添加剂较敏感。4,培养环境的影响。5,细胞染菌。
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问
关于原代神经细胞培养细胞培养板?
bamboopiggy
将多聚赖氨酸稀释为0.1mg/ml,加入培养皿或将玻片浸入其中,5min,然后60度烘干1h,或室温干燥过夜
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问
关于原代细胞培养的问题?
心细北方
可能原因: 胰蛋白酶消化过度 ,支原体污染 ,培养基pH值过碱(NaHCO3分解) ,细胞老化 ,接种细胞起始浓度太低或太高 解决方法: 缩短胰蛋白酶消化时间或降低胰蛋白酶浓度 ,分离培养物,检测支原体。清洁支架或培养箱。如发现支原体污染,丢弃培养物。 使用无菌醋酸溶液调整pH值或充入无菌CO2
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问
跑WB时如何调节电压?
迟C迟
wb电泳电压电流及时间的选择:300mA90分钟,是1.0的胶厚度,要是0.75也行,但1.5mm的厚胶要时间长一些,另外做的蛋白如果超过100kd建议时间更长一些,若是小蛋白就减少转模时间,立春红确定最适时间。
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问
细胞冻存后如何有效复苏?
茜茜RQ1M
1.细胞实验室进行常规消毒,紫外照射40min以上。2.培养液(DMEM)、0.25%胰蛋白酶(Trypsin)恒温水浴箱37°C预热20min,备用。
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问
请问细胞传代时可以保留少量上清方便细胞适应新环境吗?
Topmicro
保留部分培养上清液可以促进细胞生长,但是我觉得你的主要问题不在这儿,可以更换血清试试。
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问
细胞复苏过程中,离心后混悬,用枪尖比较好还是用一次性巴士滴管比较好?
bamboopiggy
可以用巴氏滴管,只要能把细胞重悬起来,并且重悬的时候,冲击力不太大就好
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问
检测自噬抑制剂CQ和药物联用对细胞活力的影响
bamboopiggy
如果你要检测的是联合用药,那就不用提前用CQ预处理,因为你加进药物去以后,还有个作用时间啊,但是记得加单药的对照组。
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问
原代细胞和普通细胞放在同一培养箱中,会侵染其他细胞吗?
HALOsq
不会,除非你把你的细胞打翻在培养箱,况且,你所得的原代细胞都没有污染,那么怎么会污染其他普通细胞呢?
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