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科研学霸天团,48小时有问必答
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求助:H1975细胞是否染菌
天一湖医者
刚飘起来不久的细胞并不就是死细胞啊。只不过是亚健康状态而已,只要有足够的条件,还是能恢复的。
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问
有关软琼脂集落形成的问题
balalaLy
如果加上层胶的时候温度高可能会导致下层胶部分溶解,细胞漏下去
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问
请教请教!请问酵母可以做细胞爬片吗?万分感谢!
天一湖医者
可以,酵母是可以做细胞爬片的。
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问
细胞40x镜放大后,内部出现活动黑点,是污染吗?
bamboopiggy
看图片,不仅细胞内部,培养基中也有,感觉是污染了,你换个液,然后再看看还有没有。
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问
肺炎克雷伯氏菌感受态细胞总是电转不成功,请问OD值是需要摇至0.5还是要更高,因为0.2
府宅
制备感受态细胞主要是控制细胞在对数生长期就可以了,一般来说OD值在0.4到0.5,长到OD值0.4~0.5的细胞摄取DNA的能力比较强,不需要更高。
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问
制作血平板时出现染菌求助
迟C迟
可能原因:1、平皿、培养基灭菌不彻底;2、无菌室空气环境灭菌是否达标;3、培养箱也要定期灭菌处理;4、操作者人为原因。
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问
求助鉴别枯草芽孢杆菌
天一湖医者
枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌可以通过菌群的颜色和外形来区分。颜色上枯草芽孢杆菌呈现白色或淡黄色,金黄色葡萄球菌颜色为金色或者没有颜色。形状上枯草芽孢杆菌为链状排列,金黄色葡萄球菌为葡萄串一样的球形,菌落表面比较光滑。
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问
请问大神Lamp2b和Lamp2有区别吗?
bamboopiggy
LAMP2基因9号外显子的剪切差异可致所编码的LAMP2蛋白存在LAMP2A、LAMP2B及LAMP2C 3种亚型,区别仅在于溶酶体羧基末端跨膜区域及胞浆短尾。LAMP2A及LAMP2C在全身各组织中广泛表达,而LAMP2B则选择性地在心肌、骨骼肌及脑组织中高水平表达
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问
MOI=5是什么意思
天一湖医者
m值为单个宿主细菌细胞感染的噬菌体颗粒数,它等于试验时所用的噬菌体与细菌的数量比例,即:m=噬菌体颗粒数/宿主细菌细胞数。
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问
一碰到人的单细胞数据就解压缩不开?
dxy_d7izd139
不直接解压呢?改用R语言,在程序里面解压
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问
冻存细胞为啥要在4摄氏度保存30分钟
天一湖医者
细胞冻存的细胞冻存方法大致上是相同的,理想的是采取梯度降温,可根据自己的具体条件加以调整。4度及-20度放置时间不可过长,对于-20度来说,30分钟和更长时间没有区别。-20℃时间过长,会形成过大冰晶,造成细胞大量死亡。
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问
细胞传代最多可以传多少代?
府宅
一个人的一个细胞分裂次数有限,大约50到60次左右在动物细胞体外培养过程中细胞在培养到40-50代时,细胞的分裂速度会明显减缓,甚至完全停止。
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问
细胞为什么会出现老化现象
dxy_gwrp7ndq
1. 不要等细胞长得太满才传代。细胞太密会导致细胞状态下降,产生细胞接触性抑制。2. 细胞不要消化过度。采用胰蛋白酶消化细胞,会造成细胞表面一定程度的细胞损伤。3. 最重要的是使用优质的血清和培养基
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问
建立基因调控网络时的小问题
dxy_btpk2zd7
建议还是先看看GEO和基因表达的科普文章。GEO里的就是基因表达数据,有原始数据,有预处理过的。一般你最后拿到的应该是一个矩阵,行代表基因(通常会有2到5万),列是样本。你就从这个矩阵里挑基因出来,学习BN即可。当然,如何挑基因还是个很tricky的问题,也有很多方法。 关于重构基因调控网络,方法已经有很多。选取何种方法,关键取决于你想通过网络得到何种信息。BN十多年前就已经有所应用,听起来很fa
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问
如何选择聚乙二醇(6000)的浓度来沉淀DNA?
天一湖医者
采用 NaCl盐析法,将线粒体大分子RNA与线粒体DNA分开,得到线粒体DNA 粗制品.再用聚乙二醇6000沉淀法进行纯化,从而得到纯的线粒体DNA.
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问
原代细胞怎么扩增并保留足够数量以供试验需要?
balalaLy
复苏后要先确保保种,先继续传代到第5代左右才开始开展实验
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问
转投期刊咨询
府宅
期刊审稿偏慢,要4-8周,录取较难
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问
求助:AHRQ横断面研究质量评价条目解读
天一湖医者
Meta分析系列之四:观察性研究的质量评价工具》中找到了翻译的版本:1是否明确了资料的来源(调查,文献回顾)2是否列出了暴露组和非暴露组(病例和对照)的纳入及排除标准或参考以往的出版物?3是否给出了鉴别患者的时间阶段?4如果不是人群来源的话,研究对象是否连续?5评价者的主观因素是否掩盖了研究对象其他方面情况?6描述了任何为保证质量而进行的评估(如对主要结局指标的检测/再检测)7解释了排除分析的任何
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问
内质网应激 功能实验
天一湖医者
可以采用原代小鼠肠上皮单层培养系统同时采用衣霉素(tunicamycin,Tm)处理进行scRNA-seq(衣霉素可以通过抑制蛋白质N-糖基化来诱导内质网应激)实验。
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问
基因频率如何计算
汤姆卜丽波
A频率x,X²×3577=1382x=62.1%则a频率=37.9%
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